| 自杀基因系统HSV1-TK/GCV对MEC-1细胞的体外杀伤及诱导凋亡作用 |
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| 引用本文： | 司徒镇强,王江华,刘斌,吴军正,李焰,贾永庆.自杀基因系统HSV1-TK/GCV对MEC-1细胞的体外杀伤及诱导凋亡作用[J].实用口腔医学杂志,2003,19(5):458-461. |
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| 作者姓名： | 司徒镇强 王江华 刘斌 吴军正 李焰 贾永庆 |
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| 作者单位： | 西安第四军医大学口腔生物教研室,710032 |
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| 摘 要： | 目的：探讨HSV-TK／GCV系统对MEC-1细胞的体外作用。方法：用脂质体介导将含有HSV1-TK全长cDNA的真核表达质粒G1NATK转染人黏液表皮样癌细胞系MEC-1，经G418筛选，挑选阳性克隆，用PCR及RTPCR检测目的基因的整合及mRNA转录；分别用MTT及细胞记数法检测TK阳性细胞对GCV的体外敏感性及旁观者效应；用倒置显微镜、HE染色、活细胞荧光染色及TUNNEL染色观察GCV作用下MEC-1／TK的形态学变化。结果：PCR及RT-PCR分别从G418阳性克隆中成功扩增出404bp的特异性基因片段，将此G418抗性克隆命名为MEC-1／TK；IC50MEC-1／TK为0．7μg／m1，而MEC-1为1000μg／m1以上；当将TK阳性细胞和TK阴性细胞以不同比例混合，TK阳性细胞只占10％时，即有90％的细胞被杀死；形态学观察表明，经GCV作用，MEC-1／TK细胞变圆、脱壁、漂浮，部分细胞呈现核浓缩、核碎裂等特征，TUNNEL染色核阳性着色细胞明显增多。结论：HSV-TK／GCV系统在体外能明显杀伤MEC-1细胞，对GCV的敏感性比未转染的亲本细胞提高1000倍以上，并显示较强的旁观者效应；GCV可诱导部分MEC-1／TK细胞发生凋亡。
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| 关 键 词： | 自杀基因系统 HSVl-TK／GCV系统 MEC-1细胞 唾液腺 肿瘤 自杀基因疗法 |
| 文章编号： | 1001-3733(2003)-05-0458-04 |
| 修稿时间： | 2002年12月22 |
HSV1-TK -medicated apoptosis and cell killing effect on human epidermoid carcinoma MEC-1 cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Simplexvirus Thymidine kinase Ganciclovir Gene therapy Human mucoepidermoid carcinoma cell line Bystander effect |
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