| 三突变型低氧诱导因子-1α对人微血管内皮细胞增殖及VEGF蛋白表达的影响 |
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| 作者姓名： | Pei J Wang Y Liu C Wei X Li M Chen J Wu P |
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| 作者单位： | 裴静娴 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; 王月刚 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; 刘城 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; 魏璇 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; 李明琰 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; 陈建威 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; 吴平生 (南方医科大学南方医院心内科,广东广州,510515) ; |
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| 基金项目： | ,国家自然科学基金,国家自然科学基金青年基金 |
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| 摘 要： | 目的观察重组腺病毒三突变型低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人微血管内皮细胞(hMVECs)增殖及VEGF蛋白表达的影响。方法三突变型HIF-1α腺病毒载体(Ad-HIF-1α564/402/803)、野生型HIF-1α腺病毒载体(Ad-HIF-1αnature)、Ad-LacZ及空载腺病毒载体(Ad-Null)分别在HEK293A细胞大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,终点稀释法测定病毒滴度;双荧光素酶报告系统检测三突变型HIF-1α与野生型HIF-1α的转录活性;各重组腺病毒载体以最佳转染复数转染体外培养的hMVECs,Western blotting测定HIF-1α和VEGF蛋白表达;MTS检测Ad-HIF-1α564/402/803对细胞增殖的影响。结果三突变型HIF-1α转录活性显著高于野生型HIF-1α(P<0.001);Ad-HIF-1α564/402/803组HIF-1α和VEGF蛋白表达量高于Ad-HIF-1αnature及其他组;VEGF蛋白表达水平与HIF-1α呈剂量依赖关系。Ad-HIF-1α564/402/803组第3、5天吸光度值均显著高于Ad-HIF-1αnature及其他组(P<0.01)。结论三突变型HIF-1α在体外常氧条件下稳定高效表达,可诱导hMVECs VEGF蛋白表达上调,促进hMVECs增殖。
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| 关 键 词： | 低氧诱导因子-1α 腺病毒载体 微血管内皮细胞 血管内皮生长因子 |
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