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塔希纳病毒的重组酶介导扩增快速检测方法
引用本文:李樊,郭晓芳,殷启凯,申辛欣,付士红,许松涛,雷雯雯,周红宁,马学军,王环宇. 塔希纳病毒的重组酶介导扩增快速检测方法[J]. 疾病监测, 2020, 35(3): 192-196. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.03.004
作者姓名:李樊  郭晓芳  殷启凯  申辛欣  付士红  许松涛  雷雯雯  周红宁  马学军  王环宇
作者单位:1.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所虫媒室,卫生健康委生物安全重点实验室,北京 102206
基金项目:国家科技重大专项;传染病预防控制国家重点实验室重点项目;国家重点研发计划
摘    要:目的采用反转录重组酶介导核酸扩增(RT-RAA)方法建立塔希纳病毒(TAHV)检测方法。方法在TAHV S节段保守区设计引物和探针。用构建含检测目的基因片段的质粒和病毒细胞培养物对TAHV的RT-RAA检测方法的灵敏性进行评价,通过检测黄病毒属、甲病毒属、正布尼亚病毒属和东南亚十二节段病毒属共7种病毒验证方法的特异性。并选用2018年采集自宁夏回族自治区的30批次蚊虫样本来评价该检测方法。结果该方法对构建的质粒标准品的检测下线为100拷贝/反应,病毒培养物最低检出限为10空斑形成单位/反应,与其他7种虫媒病毒无交叉反应。在检测蚊虫样本时,该方法与实时定量PCR方法检测结果的一致性为100%。结论建立了快速、特异以及灵敏的TAHV的RT-RAA检测方法,并适用于标本中TAHV核酸的现场检测。

关 键 词:塔希纳病毒  检测  核酸  重组酶介导扩增
收稿时间:2019-09-24

Establishment of a reverse transcription recombinase-mediated amplification assay for rapid detection of Tahyna virus
Li Fan,Guo Xiaofang,Yin Qikai,Shen Xinxin,Fu Shihong,Xu Songtao,Lei Wenwen,Zhou Hongning,Ma Xuejun,WangHuanyu. Establishment of a reverse transcription recombinase-mediated amplification assay for rapid detection of Tahyna virus[J]. Disease Surveillance, 2020, 35(3): 192-196. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.03.004
Authors:Li Fan  Guo Xiaofang  Yin Qikai  Shen Xinxin  Fu Shihong  Xu Songtao  Lei Wenwen  Zhou Hongning  Ma Xuejun  WangHuanyu
Affiliation:(Department of Arboviruses,National Health Commission Key Laboratory of Biosafety,National Institute for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 102206,China;State Key Laboratory of Infectious Disease Prevention and Control,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 102206,China;Yunnan Institute of Parasitic Diseases,Puer 665000,Yunnan,China;Department of Core Facility,National Institute for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 102206,China)
Abstract:
Keywords:
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