塔希纳病毒的重组酶介导扩增快速检测方法 |
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引用本文: | 李樊,郭晓芳,殷启凯,申辛欣,付士红,许松涛,雷雯雯,周红宁,马学军,王环宇.塔希纳病毒的重组酶介导扩增快速检测方法[J].疾病监测,2020,35(3):192-196. |
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作者姓名: | 李樊 郭晓芳 殷启凯 申辛欣 付士红 许松涛 雷雯雯 周红宁 马学军 王环宇 |
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作者单位: | 1.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所虫媒室,卫生健康委生物安全重点实验室,北京 102206 |
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基金项目: | 国家科技重大专项;传染病预防控制国家重点实验室重点项目;国家重点研发计划 |
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摘 要: | 目的采用反转录重组酶介导核酸扩增(RT-RAA)方法建立塔希纳病毒(TAHV)检测方法。方法在TAHV S节段保守区设计引物和探针。用构建含检测目的基因片段的质粒和病毒细胞培养物对TAHV的RT-RAA检测方法的灵敏性进行评价,通过检测黄病毒属、甲病毒属、正布尼亚病毒属和东南亚十二节段病毒属共7种病毒验证方法的特异性。并选用2018年采集自宁夏回族自治区的30批次蚊虫样本来评价该检测方法。结果该方法对构建的质粒标准品的检测下线为100拷贝/反应,病毒培养物最低检出限为10空斑形成单位/反应,与其他7种虫媒病毒无交叉反应。在检测蚊虫样本时,该方法与实时定量PCR方法检测结果的一致性为100%。结论建立了快速、特异以及灵敏的TAHV的RT-RAA检测方法,并适用于标本中TAHV核酸的现场检测。
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关 键 词: | 塔希纳病毒 检测 核酸 重组酶介导扩增 |
收稿时间: | 2019-09-24 |
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