| 摘 要： | 目的通过RNA-seq分析鹅掌草三萜皂苷对H22肝癌细胞构建的裸鼠皮下移植瘤转录组的影响,初步阐明鹅掌草三萜皂苷对肝癌抑制作用机制,为推广鹅掌草三萜皂苷治疗肝癌提供理论基础。方法建立H22细胞裸鼠皮下移植瘤模型,实验分为模型组及鹅掌草三萜皂苷高、中、低剂量(15,10,5mg/kg)组,给药干预21d后收集模型组及高剂量组肿瘤组织进行RNA-seq分析;根据RNA-seq结果,利用qRT-PCR检测差异基因磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3激酶催化亚单位伽马亚型(Pik3cg)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt1),丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Mtor)等基因的表达水平。结果不同浓度(15,10,5mg/kg)的鹅掌草三萜皂苷干预21d后,与模型组(0mg/kg)比较,均能抑制肝癌H22肿瘤组织增殖,其中高剂量组抑制肿瘤增殖效果最显著。通过RNA-seq分析,高剂量组与模型组比较,共导致202个基因表达发生显著变化,其中197个基因显著下调(P0.01)。这些差异基因被富集于Hematopoietic cell lineage、Cytokine-cytokine receptor interaction、MAPK signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway、PPAR signaling pathway、Chemokine signaling pathway等通路,影响肝癌细胞的增殖、免疫;通过qRT-PCR检测发现鹅掌草三萜皂苷能够显著降低P3ikcg、Akt1、Mtor的转录水平,提高磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸三磷酸酶和双特异性蛋白磷酸酶(Pten)的转录水平。结论通过RNA-seq检测及分析,PI3K/AKT mTOR信号通路的抑制可能在鹅掌草三萜皂苷抑制肝癌细胞增殖中发挥作用。
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