|
|||||
|
|
| 构建重组大鼠pEGFP-N1-IGF-1基因表达质粒 | |
| 引用本文： | 李红宇,高松,王莹,袁文,张竟,吕碧涛,徐盛明. 构建重组大鼠pEGFP-N1-IGF-1基因表达质粒[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2006, 10(48): 122-125 |
| 作者姓名： | 李红宇 高松 王莹 袁文 张竟 吕碧涛 徐盛明 |
| 作者单位： | 1. 解放军第二军医大学长征医院骨科,上海市,200003 2. 解放军第二○一医院放射科,辽宁省,辽阳市,111000 3. 锦州市中心医院眼科,辽宁省,锦州市,120001 |
| 摘 要： | 目的:构建胰岛素样生长因子1基因的真核表达质粒(pEGFP-N1-IGF-1),为基因治疗脊髓损伤提供前提。方法:实验于2005-04/06在上海基康生物公司实验室完成。应用反转录-聚合酶链反应方法从大鼠肝脏组织总RNA中提取并扩增胰岛素样生长因子1基因的全长cDNA,并将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,以构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-1。结果:实验从大鼠肝脏组织中提取总RNA,以反转录-聚合酶链反应方法获取编码胰岛素样生长因子1基因的全序列cDNA。构建胰岛素样生长因子1cDNA真核表达质粒时将能发出绿色荧光的增强型绿色荧光蛋白报告基因融合在胰岛素样生长因子1基因,并经酶切后DNA电泳鉴定及DNA测序证实。结论:构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-1成功,实验中将能发出绿色荧光的增强型绿色荧光蛋白报告基因融合在胰岛素样生长因子1基因的3'端,并以编码柔软肽段的核苷酸连接,即保留了胰岛素样生长因子1的神经营养活性,又便于基因治疗中可检测到蛋白表达。 |
| 关 键 词： | 胰岛素样生长因子Ⅰ 绿色荧光蛋白质类 遗传载体 克隆 分子 寡核苷酸序列分析 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)48-0122-04 |
| 修稿时间： | 2006-04-15 |
Construction of recombinant gene expression plasmid pEGFP-N1-IGF-1 in rats |
|
| Li Hong-yu,Gao Song,Wang Ying,Yuan Wen,Zhang Jing,Lü Bi-tao,Xu Sheng-ming. Construction of recombinant gene expression plasmid pEGFP-N1-IGF-1 in rats[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2006, 10(48): 122-125 | |
| Authors: | Li Hong-yu Gao Song Wang Ying Yuan Wen Zhang Jing Lü Bi-tao Xu Sheng-ming |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |