胶原酶消化分离兔关节软骨细胞及体外聚集培养的观察

目的通过观察采用单一胶原酶消化分离、体外聚集培养获得的兔关节软骨细胞的生物学性状,证实这种获得方法的可靠性。方法取活体成年兔关节软骨,体外采用Ⅱ型胶原酶一次性消化,高密度聚集培养后用倒置显微镜观察细胞形态及生长情况,常规染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色法观察软骨细胞表型变化。结果 （1）收集细胞总量为（1.2～2.6）×105个·g-1。台盼兰检测细胞活性率平均为96.7%。（2）前三代细胞生长迅速,形态呈短梭形、三角形、多边形等,融合时呈卵圆形。（3）经过聚集扩增培养后Mallory及甲苯胺兰异染反应均为阳性,Ⅱ型胶原免疫组化结果为阳性。结论单一胶原酶消化分离、体外聚集培养这一方法可以获取大量优良的软骨细胞。