| 免疫磁珠法分离人外周血CD4+CD25+调节性T细胞 |
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| 引用本文： | 牛微,杨曌,尚小云,傅晓岚,唐艳,黎万玲,姜曼,王莉,吴玉章.免疫磁珠法分离人外周血CD4+CD25+调节性T细胞[J].免疫学杂志,2007,23(4):449-451,455. |
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| 作者姓名： | 牛微 杨曌 尚小云 傅晓岚 唐艳 黎万玲 姜曼 王莉 吴玉章 |
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| 作者单位： | 第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的 建立人外周血单个核细胞中CD4 CD25 调节性T细胞(regulatery T cells,Treg)免疫磁性细胞分离力(megnetic activated cell sorting,MACS),并鉴定其分离效率.方法 采用免疫磁珠两步法(即阴性分选和阳性分选2步)分离人周血单个核细胞中的CD4 CD25 调节性T细胞,首先采用生物素标记的鸡尾酒抗体和抗生物素标记的磁珠阴性分选CIM细胞,再用抗CD25 的磁珠阳性分选CD4 CD25 T细胞.分离后的细胞经抗体染色后再通过流式细胞仪检测其分离纯度;内因子染色检测其转录因子FOXV3的表达频率;台盼蓝染色检测细胞的存活率;3H-TdR掺入法检测其对CD4 CD25-T细脆殖抑制效应.结果 阴性分选CD4 T细胞的纯度为(92.2±1.7)%,阳性分选后CD4 CD25 Treg细胞的纯度(95.1±1.2)%.胞内因子染色FOXF3在CD4 CD25 Treg细胞中的表达率为(80.4±1.2)%,台盼蓝染色细胞存活率为(95.6±3.3)%.3H-TdR掺入法检测其对CIM CD25-T细胞具有明显的抑制作用.结论 采用免疫磁性细胞分离技术能够高效、快地得到一群纯度高并且细胞活力好的CD4 CIY25 Treg,为进一步研究其功能提供了方便.
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| 关 键 词： | 磁性细胞分离 CD4 CD25 调节性T细胞 FOXF3表达 免疫磁珠法分离 人外周血 调节性 细胞活力 Isolation system sorting mononuclear cells magnetic peripheral blood human 功能 研究 细胞分离技术 抑制作用 细胞存活率 表达率 胞内因子 结果 抑制效应 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）04-0449-04 |
| 修稿时间： | 2007-01-292007-03-16 |
Isolation of CD4+ CD25+ regulatory T cell from human peripheral blood mononuclear cells by magnetic cell sorting system |
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| NIU Wei,YANG Zhao,SHANG Xiao-Yu,FU Xiao-lan,TANG Yan,LI Wan-ling,JIANG Man,WANG Li,WU Yu-zhang.Isolation of CD4+ CD25+ regulatory T cell from human peripheral blood mononuclear cells by magnetic cell sorting system[J].Immunological Journal,2007,23(4):449-451,455. |
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| Authors: | NIU Wei YANG Zhao SHANG Xiao-Yu FU Xiao-lan TANG Yan LI Wan-ling JIANG Man WANG Li WU Yu-zhang |
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| Institution: | Institute of Immunology, PIA, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Magnetic cell sorting CD4+CD25+ regulatory T cell FOXP3 expression |
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