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同时沉默Livin基因和MTA1基因的siRNA载体的构建
引用本文:杨松华,赵国强,郑红,李月白,赵继敏,冯龙,董子明. 同时沉默Livin基因和MTA1基因的siRNA载体的构建[J]. 郑州大学学报(医学版), 2008, 43(2): 202-205
作者姓名:杨松华  赵国强  郑红  李月白  赵继敏  冯龙  董子明
作者单位:1. 郑州大学基础医学院病理生理学教研室,郑州,450001
2. 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001
3. 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室,郑州,450001
4. 郑州大学基础医学院生物化学教研室,郑州,450001
基金项目:教育部211工程重点学科建设项目
摘    要:目的:构建同时沉默Livin基因和MTA1基因的小干扰RNA(siRNA)载体.方法:设计Livin和MTA1的siRNA靶序列,合成它们互补的寡核苷酸链,分别退火后重组入pRNAT-U6.2载体,得到pRNAT-U6.2-Livin和pRNAT-U6.2-MTA1.AccⅡ和XhoⅠ酶切pRNAT-U6.2-MTA1,回收475 bp的MTA1 siRNA单元,然后与XhoⅠ和PmeⅠ酶切线形化的pRNAT-U6.2-Livin重组,得到pRNAT-U6.2-Livin-MTA1,后者用脂质体包被转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR法分别检测转染细胞Livin和MTA1基因mRNA的表达情况.结果:针对Livin基因和MTA1基因的siRNA的双链寡核苷酸片段分别克隆入pRNAT-U6.2载体,经测序分析插入片段正确.PCR扩增证实MTA1 siRNA单元重组入pRNAT-U6.2-Livin.RT-PCR检测显示,转染pRNAT-U6.2-Livin-MTA1的EC9706细胞Livin基因和MTA1基因mRNA表达水平皆明显降低.结论:同时沉默Livin基因和MTA1基因表达的siRNA载体构建成功.

关 键 词:RNA干扰  Livin  MTA1  载体构建
修稿时间:2007-12-25

Construction of siRNA vector targeting human Livin and MTA1 genes
YANG Songhua,ZHAO Guoqiang,ZHENG Hong,LI Yuebai,ZHAO Jimin,FENG Long,DONG Ziming. Construction of siRNA vector targeting human Livin and MTA1 genes[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2008, 43(2): 202-205
Authors:YANG Songhua  ZHAO Guoqiang  ZHENG Hong  LI Yuebai  ZHAO Jimin  FENG Long  DONG Ziming
Abstract:
Keywords:
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