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| pSiRNA-Shh逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞作用的离体实验研究 | |
| 引用本文： | 尹昌林,吕胜青,黄轶,李光辉,唐莉,杨辉. pSiRNA-Shh逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞作用的离体实验研究[J]. 中国实验诊断学, 2007, 11(5): 598-602 |
| 作者姓名： | 尹昌林 吕胜青 黄轶 李光辉 唐莉 杨辉 |
| 作者单位： | 1. 第三军医大学新桥医院,神经外科,重庆,400037 2. 重庆医科大学,生化与分子生物学教研室 3. 第三军医大学新桥医院,肿瘤研究所,神经外科,重庆,400037 4. 第三军医大学西南医院,乳腺疾病中心 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;重庆市自然科学基金 |
| 摘 要： | 目的建立逆转录病毒介导的人Shh基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Shh基因RNA干扰逆转录病毒载体pSiRNA-Shh,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染恶性脑胶质瘤细胞株U251和CHG-5细胞,用WST-8、RT-PCR和Western Blotting分别检测对转染细胞活性、人Shh mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA-Shh质粒经测序鉴定正确。重组逆转录病毒滴度可达210×104CFU/ml,感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞株后3 d能明显抑制细胞生长,RT-PCR和Western Blotting检测人Shh mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段的逆转录病毒体现出明显的抑制恶性脑胶质瘤细胞生长作用,为下一步开展基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础。 |
| 关 键 词： | pSiRNA-Shh逆转录病毒载体 恶性脑胶质瘤 基因治疗 |
| 文章编号： | 1007-4287（2007）05-0598-05 |
| 收稿时间： | 2006-10-18 |
| 修稿时间： | 2006-10-18 |
Construction of pSiRNA-Shh recombinant retroviral vector and its application in malignant glioma cells in vitro |
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| YIN Chang-lin. Construction of pSiRNA-Shh recombinant retroviral vector and its application in malignant glioma cells in vitro[J]. Chinese Journal of Laboratory Diagnosis, 2007, 11(5): 598-602 | |
| Authors: | YIN Chang-lin |
| Abstract: | |
| Keywords: | pSiRNA-Shh retroviral vector malignant glioma gene therapy |
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