香烟提取物对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的： 探讨香烟提取物（CSE）对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖作用及可能机制。方法: 16只SD大鼠随机分为对照组和哮喘组，各8只。原代培养大鼠ASMCs，取第3-6代细胞，分为对照组、对照+CSE组、哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+嘧啶基-苯磺酰胺（GW8510，细胞周期蛋白依赖激酶-4抑制剂）组、哮喘+GW8510组。用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐（MTT）法及增殖细胞核抗原（PCNA）免疫细胞化学技术检测ASMCs增殖；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹（Western blotting）检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果: （1）哮喘组ASMCs与对照组ASMCs相比，在S+G2/M期比例、吸光度（A）值和PCNA表达率上明显增高，差异显著（P＜0.01）。（2）哮喘组ASMCs S+G2/M期比例、吸光度（A）值和PCNA表达率分别为(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%；哮喘+CSE组分别为（32.12±1.17）%、0.801±0.210、（90.2±7.3）%；哮喘+CSE+GW8510组分别为(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%；哮喘+GW8510组分别为(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%。除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外，其余两两比较差异均显著（P＜0.01）。（3）哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+GW8510组、哮喘+GW8510组ASMCs cyclin D1 mRNA A值比值和蛋白表达A值比值分别为0.236±0.045、0.271±0.002；0.369±0.124、0.379±0.002；0.231±0.075、0.261±0.002；0.165±0.064、0.193±0.002。除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外，其余两两比较差异均显著（P＜0.01）。结论: 正常与哮喘大鼠ASMCs在CSE干预后增殖明显加快，cyclin D1表达明显增加。CSE可能是通过cyclin D1参与调控哮喘大鼠ASMCs的增殖。

Effect of cigarette smoke extract on proliferation of airway smooth muscle cells in bronchial asthmatic rats