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内皮细胞对结肠癌细胞系SW480中CD133~+细胞表达VEGF的影响
引用本文:尚立娜,杨爱军,王晨昱,刘伟,牛云霞,李敏.内皮细胞对结肠癌细胞系SW480中CD133~+细胞表达VEGF的影响[J].第三军医大学学报,2010,32(16).
作者姓名:尚立娜  杨爱军  王晨昱  刘伟  牛云霞  李敏
作者单位:1. 兰州大学基础医学院病理学研究所,兰州,730000
2. 730000,兰州,兰州大学基础医学院病理学研究所;730000,兰州,兰州大学基础医学院甘肃省新药临床前研究重点实验室
基金项目:甘肃省自然科学研究基金 
摘    要:目的 从结肠癌细胞系SW480中分离结肠癌干细胞,并检测内皮细胞对这些细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响.方法 分别利用免疫磁珠分选技术和尤血清培养法富集CD133+细胞,利用MTT法和平板克隆形成实验检测其生物学特性;采用细胞免疫荧光法检测SW480细胞和CD133+细胞中CD133及VEGF的表达;将SW480细胞或磁珠分选CD133+细胞分别在6种培养条件下进行培养:SW480细胞在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养、SW480细胞在尤血清培养基(serum-free medium,SFM)中培养、磁珠分选CD133+细胞在SFM中培养、SW480细胞与内皮细胞在SSM中共培养、SW480细胞与内皮细胞在SFM共培养、磁珠分选CD133+细胞与内皮细胞在SFM共培养,利用免疫组织化学法检测不同培养条件下结肠癌细胞中CD133及VEGF的表达情况.结果 SW480细胞系中存在少量的CD133+细胞,这些细胞能够连续传代并且表现出更强的增殖潜力以及克隆形成能力.经细胞免疫荧光法检测发现SW480细胞高表达VEGF,低表达CD133,而免疫磁珠分选的CD133+细胞所形成的细胞球低表达VEGF,高表达CD133.无血清培养条件下的SW480细胞随着时间的延长CD133表达率逐渐增加,添加内皮细胞诱导后无血清培养的SW480细胞与前者相比CD133阳性率显著增加(P<0.05).经过1周的连续培养后,CD133+细胞表达VEGF的比例没有变化,添加内皮细胞诱导1周后,CD133+细胞表达VEGF的比例显著增加(P
关 键 词:结肠肿瘤  肿瘤干细胞  血管内皮生长因子类  内皮细胞  新生血管化  病理性

Effect of endothelial cells on VEGF expression in CD133~+ cells from SW480 cells
Shang Lina,Yang Aijun,Wang Chenyu,Liu Wei,Niu Yunxia,Li Min.Effect of endothelial cells on VEGF expression in CD133~+ cells from SW480 cells[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2010,32(16).
Authors:Shang Lina  Yang Aijun  Wang Chenyu  Liu Wei  Niu Yunxia  Li Min
Institution:Shang Lina1,Yang Aijun1,Wang Chenyu1,Liu Wei1,Niu Yunxia1,Li Min1,2 (1Institute of Pathology,2Key Laboratory of Pre-clinical Study for New Drugs of Gansu Province,Basic Medical College of Lanzhou University,Lanzhou,Gansu Province,730000,China)
Abstract:Objective To isolate colon cancer stem cells from the colon cancer cell line SW480 and investigate the effect of endothelial cells on VEGF expression in these cells.Methods Serum-free medium under floating culture system and magnetic activated cell sorting techniques were used to enrich or separate CD133+ cells from SW480 cells.The biological characteristics of CD133+ cells were estimated by MTT method and colony formation assay.The expression of CD133+ and VEGF of the CD133+ cell-formed tumor spheroids and...
Keywords:CD133
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