HSV1—tk／GCV系统对前列腺癌基因治疗的实验研究

目的：前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一。临床常用的治疗方案包括雄激素去势治疗、放射治疗等能取得近期效果。但对于雄激素非依赖性前列腺癌和雄激素非依赖性骨转移癌，至今尚无行之有效的临床治疗方案，本研究采用逆转录病毒载体介导单弛疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶（Herpes Simplex Virus Type ⅠThymidine Kinase,HSV1-tk)结合环氧鸟苷（Ganciclovir,GV)，就三种前列腺癌细胞系（C4、C4－2、PC3）进行体外基因治疗观察，以便为进行体内实验和临床应用提供有意义的实验依据。方法：将逆转录病毒载体pN2A与HSV1－tk基因重组，转染包装细胞系PA317，经G418筛选，选择高病毒滴度的生产细胞系（Virus producer cells,VPC）PCR、RT－PCR检测VPC内HSV1－tk基因整合和表达。VPC与三种癌细胞胺1：1，1:2,1:4,1:8的比例混合培养，以硫基罗丹B（Sulforhodamine B,SRB)法测定GCV治疗后第1、3、5、7天的细胞对雄激素非依赖性前列腺癌及骨转移性前列腺癌均有杀伤效应，其中以1：1的剂量和第五天效果最佳；镜下没有发现凋亡小体；其与其他两种癌细胞相比较，HSV1-tk/GCV系统对PC3的治疗效果最好，具有统计学差异。结论：HSV1－tk/GCV系统三对种体外培养的前列腺癌细胞均有杀伤作用，其杀伤机制是通过细胞毒作用。VPC与肿瘤细胞混合培养，以1：1并给予GCV后第五天疗效最佳。本研究对雄激素非依赖性前列腺癌及骨转移性前列腺癌提出了一个新的治疗方案。