| 人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建 |
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| 引用本文： | 羊东晔,卢放根,赵水平,汤熙翔,刘小伟,吴小平.人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建[J].湖南医科大学学报,2003,28(4):338-342. |
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| 作者姓名： | 羊东晔 卢放根 赵水平 汤熙翔 刘小伟 吴小平 |
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| 作者单位： | [1]中南大学湘雅二医院消化内科，长沙410011 [2]中南大学湘雅二医院心内科，长沙410011 [3]生生基因药物研究所，长沙410008 |
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| 摘 要： | 目的：为满足基因治疗的需要构建人白细胞介素12(hIL－12)双亚基共表达质粒。方法：先从人胚肾组织的逆转录产物中用PCR方法扩增出它的两个亚基P40和P35的cDNA全长，分别克隆入真核表达载体pcDNA3．1( ／-)中构建单亚基质粒——P( )／P40和P(-)／P35，然后再将二者串联克隆入真核表达载体poDNA3．1( )中得到P( )／IL-12质粒。脂质体转染HepG2后24，48h ELISA检测细胞培养上清内hIL-12蛋白质表达。结果：P( )／IL-12质粒经酶切和测序证明两亚基连接方向正确，序列无突变；ELISA检测细胞上清结果证实可表达hIL-12蛋白质。结论：成功构建P40和P35双亚基真核共表达质粒——P( )／IL-12，为模拟hIL-12生理表达方式，简化hIL-12基因治疗操作奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人白细胞介素12 双亚基 表达 真核载体 克隆 |
Construction of double-subunit co-expression eukaryotic vector of human interleukin 12] |
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| Dong-ye Yang,Fang-gen Lu,Shui-ping Zhao.Construction of double-subunit co-expression eukaryotic vector of human interleukin 12][J].Bulletin of Hunan Medical University,2003,28(4):338-342. |
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| Authors: | Dong-ye Yang Fang-gen Lu Shui-ping Zhao |
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| Institution: | Department of Gastroenterology, Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011, China. |
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