| 三联组氨酸核苷酸结合蛋白2启动子报告基因质粒的构建和活性鉴定 |
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| 引用本文： | 许呈扬,蔡少鑫. 三联组氨酸核苷酸结合蛋白2启动子报告基因质粒的构建和活性鉴定[J]. 海峡药学, 2016, 0(11): 252-254. DOI: 10.3969/j.issn.1006-3765.2016.11.136 |
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| 作者姓名： | 许呈扬 蔡少鑫 |
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| 作者单位： | 1. 福建省立医院 药学部 福州 350001;2. 福建省立医院 肿瘤外科 福州 350001 |
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| 基金项目： | 福建卫生厅中青年骨干项目( No.2013-ZQN-JC-6 );福建科技厅面上项目(General program 2015J01422)，福建省卫生厅青年项目(2014-1-4) |
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| 摘 要： | 目的 三联组氨酸核苷酸结合蛋白2(Hint2,histidine triad nucleotide binding protein 2)在肝癌组织中低表达并与临床病理分期和病人预后密切相关,为研究Hint2的基因表达调控,构建人Hint2启动子荧光素酶报告基因质粒并鉴定活性.方法 提取人基因组DNA,以其为模板,将含有Hint2启动子的不同长度的片段插入荧光素酶质粒pGL3-basic,后与β-半乳糖苷酶共转染HeLa细胞,转染后24h通过β-半乳糖苷酶实验检测转染效率,通过荧光素酶实验检测转录活性.结果 质粒pGL3-h1(-6--463,457bp),pGL3-h2(-6--1255,1249bp)构建成功后,与 β-半乳糖苷酶共转染人子宫颈癌HeLa细胞.转录活性=荧光素酶值/β-半乳糖苷酶值,结果 显示pGL3-basic荧光素酶值/β-半乳糖苷酶值为147.3272,而pGL3-h1为67936,pGL3-h2为64234.19.空质粒与pGL3-h1,pGL3-h2之间差异具有统计学意义,而pGL3-h1,pGL3-h2之间差异不具有统计学意义.结论 Hint2位于转录起始位点上游-6至--463之间的启动子区域具有强转录活性.
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| 关 键 词： | Hint2 启动子 荧光素酶 |
Construction and Identification of luciferase Reporter Vectors Containing Human Hint2 Promoter |
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