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尼古丁对血管内皮细胞自噬的影响
引用本文:马琴,郭蕊,闫喆一,崔桂丽,闫佳敏,王亚静. 尼古丁对血管内皮细胞自噬的影响[J]. 医学研究杂志, 2016, 45(7): 131-134
作者姓名:马琴  郭蕊  闫喆一  崔桂丽  闫佳敏  王亚静
作者单位:030001 太原, 山西医科大学生理学系;030001 太原, 山西医科大学生理学系;030001 太原, 山西医科大学生理学系;030001 太原, 山西医科大学生理学系;030001 太原, 山西医科大学生理学系;030001 太原, 山西医科大学生理学系
摘    要:目的 初步探讨尼古丁对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endotheliel cell,HUVEC)自噬的影响。方法 采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术分别检测尼古丁不同浓度(0、6×10-8、6×10-7、6×10-6和6×10-5mol/L)和不同时间(浓度为6×10-6mol/L时,分别干预0、1.5、3、6和12h)作用后,人脐静脉内皮细胞中自噬标志性蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)蛋白表达水平的变化,以确定尼古丁的最佳刺激浓度和最佳刺激时间。依据尼古丁最佳条件将体外培养的HUVE细胞随机分组:对照组、尼古丁处理组,Western blot法检测LC3Ⅱ、多聚泛素结合蛋白p62/SQSTM1(p62)和溶酶体相关膜蛋白-2(LAMP-2)的蛋白表达,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率。结果 体外实验显示,LC3Ⅱ蛋白表达呈浓度和时间依赖性,且尼古丁浓度为6×10-6mol/L、时间为6h时,LC3Ⅱ蛋白表达最多(P<0.01)。与对照组相比,尼古丁处理组LC3Ⅱ、p62蛋白表达显著增加(P<0.05),LAMP2蛋白表达减少(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.01)。结论 尼古丁可以引起自噬体与溶酶体融合障碍,使自噬降解异常,导致内皮细胞自噬功能紊乱,促进细胞凋亡。

关 键 词:尼古丁|人脐静脉内皮细胞|自噬|LC3Ⅱ
收稿时间:2015-11-26
修稿时间:2015-12-14

Effects of Nicotine on Utophagy in Vascular Endothelial Cells
Ma Qin,Guo Rui,Yan Zhiyi. Effects of Nicotine on Utophagy in Vascular Endothelial Cells[J]. Journal of Medical Research, 2016, 45(7): 131-134
Authors:Ma Qin  Guo Rui  Yan Zhiyi
Affiliation:Department of Physiology, Shanxi Medical University, Shanxi 030001, China;Department of Physiology, Shanxi Medical University, Shanxi 030001, China;Department of Physiology, Shanxi Medical University, Shanxi 030001, China;Department of Physiology, Shanxi Medical University, Shanxi 030001, China;Department of Physiology, Shanxi Medical University, Shanxi 030001, China;Department of Physiology, Shanxi Medical University, Shanxi 030001, China
Abstract:
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