人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38经60Co照射后线粒体量与功能的改变 |
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作者姓名: | 孙青菊 王学敏 朱克军 龙建刚 缪明永 焦炳华 |
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作者单位: | 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,中国博士后科学基金 |
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摘 要: | 目的:检测人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38受到60Co γ射线照射后线粒体DNA(mtDNA)的相对含量和线粒体功能的改变;探讨γ射线照射后细胞线粒体的变化规律.方法:四氮唑盐(MTT)比色法测细胞活力;采用竞争PCR法测定mtDNA的相对含量;荧光染料R123和TMRM分别标记,流式细胞仪测定线粒体膜电位的变化;酶标分光仪测定线粒体呼吸链氧化酶-NADH氧化酶反应2 min内活性变化.结果:与正常细胞相比,60Co γ射线照射后,照射组细胞明显肿胀,变短,边缘不整齐,排列紊乱,数量减少;细胞活力(0.359±0.02)明显低于正常组(0.598±0.03,P<0.05);线粒体膜电位约下降为原来的50%;NADH氧化酶活性也降低,最大反应速度由48.93 μmol/(mg*min)降为27.80 μmol/(mg*min);以核18S rDNA为内参照,照射组mtDNA相对含量为(1.680±0.082),明显高于正常组的(1.296±0.077).结论:γ射线照射后,WI-38细胞mtDNA相对含量的增高可能是线粒体功能下降的一种代偿性反应.
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关 键 词: | WI-38细胞 γ射线 DNA 线粒体 膜电位 |
文章编号: | 0258-879X(2005)08-0885-03 |
收稿时间: | 2005-02-01 |
修稿时间: | 2005-02-01 |
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