bmi-1原癌基因在不同来源CD34^+细胞的表达 |
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引用本文: | 张雅容,;魏亚明,;许艳丽,;林秀梅,;汪云霞,;王晓华.bmi-1原癌基因在不同来源CD34^+细胞的表达[J].中国临床康复,2008(25):4891-4894. |
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作者姓名: | 张雅容 ;魏亚明 ;许艳丽 ;林秀梅 ;汪云霞 ;王晓华 |
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作者单位: | [1]广州医学院生化教研室,广东省广州市510182; [2]广州市第一人民医院中心实验室,广东省广州市510182 |
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基金项目: | 广州市科技计划项目(20D7J1-C0091)“白血病干细胞信号分子βcatcnin、Bmi-1调节与耐药逆转”;广州市医药卫生科技项目(2006-YB002)“白血病干细胞信号调节及其耐药逆转研究” |
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摘 要: | 目的:Bmi-1是一种属于PcG家族的原癌基因,它直接参与细胞生长、增殖的调节,是成体干细胞和白血病干细胞自我更新所必需的。检测原痛基因bmi-1在不同来源CD34^+细胞中的表达,探讨其与细胞增殖的关系。
方法:实验于200703/11在广州医学院生化教研室完成。①实验材料:白血病细胞株SHI-1由苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所薛永权教授惠赠;脐血由广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科提供。实验经产妇知情同意,并经医院伦理委员会批准:外周血采自健康成年自愿捐献者。②实验方法:以CD34免疫磁珠标记急性单核细胞白血病细胞株SHI-1,上柱分选CD3矿细胞,脐血单个核细胞以同样的方法标记CD34免疫磁珠标记和分选CD34^+细胞,应用流式细胞仪分析分选后CD34^+的寓集度:将分选前后的CD34^+、CD34^SHI—1细胞以相同的密度接种于24孔板,分不同的时间点计数细胞,并绘制生长曲线。选用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞。以正常脐带血和外周单个核细胞为对照,采用半定最RT—PCR法检测bmi—1基因在不同来源CD34^+细胞中的表达。
结果:①SHI—1细胞分选前后标记CD34^+PE、CD38^+FITC流式分析显示,分选后CD34^+细胞的富集度为99%以上。②SHI-1-CD34^+细胞旱缓慢生长趋势,不同于分选前细胞的指数生长状态。③RT-PCR检测显示,bmi-1 mRNA在SHI—1—CD34^+细胞中的表达高于其在脐肌-CD34^+与外周血单个核细胞中的表达(P〈0.05)。bmi-1 mRNA在SHI—1、SHI—1—CD34^+、SHI-1-CD34^+细胞中表达差异不显著,在脐血L—CD34^-细胞中弱表达或不表达。
结论:bmi-1基因在SHI细胞株CD34^+与CD34^-细胞中均高表达,说明其与血液细胞的高增殖能力密切相关。
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关 键 词: | bmi-1基因 CD34^+细胞 免疫磁珠 流式细胞仪 干细胞 |
Expression of bmi-1 in CD34^+ cells from different sources |
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Institution: | Zhang Ya-rong, Wei Ya-ming, Xu Yan-li, Lin Xiu-mei, Wang Yun-xia, Wang Xiao-hua(1Departurent of Biochemistry. Guangzhou Medical College, Guangzhou 510182. Guangdong Province. China; 2Central Laboratory. Guangzhou First People's Hospital, Guangzhou 510182. Guangdong Province, China) |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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