永生化骨髓间充质干细胞克隆形成能力和致瘤性的实验研究

目的探讨永生化人骨髓间充质干细胞（hBMSC）用于软骨组织工程的可能性及安全性。方法自健康志愿者骨髓中提取原代hBMSC，流式细胞仪检测表型后建立永生化hBMSC，将hBMSC及永生化hBMSC细胞悬液接种于双层软琼脂培养基中，2周后观察克隆形态并计算克隆形成率；将两种细胞接种于裸鼠背部皮下，术后3d及1、3个月肉眼观察成瘤情况。结果hMSC表面抗原CD34、CD45表达阴性，CD扮、CD71、CD106表达阳性；hBMSC未能在软琼脂中形成克隆，永生化hBMSC克隆形成率为0．3％；永生化hBMSC接种裸鼠后3d接种部位有细胞聚集的团块，1、3个月时均未见肿瘤形成。结论本研究通过转基因技术建立的永生化hBMSC增殖能力较强，但无致瘤性，可作为种子细胞用于软骨组织工程中。