洋甘菊活性组分对LPS诱导人支气管上皮细胞的保护作用及机制研究

目的 基于驱动蛋白家族 3A 基因（Kif3a）和 Sonic hedgehog（SHH）信号通路探讨洋甘菊活性组分对脂多糖（LPS）诱导的人支气管上皮细胞（16HBE）的保护作用及机制。方法 用LPS诱导16HBE建立哮喘炎症细胞模型。CCK-8法检测不同浓度洋甘菊活性组分对LPS诱导16HBE的增殖的抑制作用，筛选出最佳洋甘菊活性组分给药浓度。将细胞分为空白对照组、LPS模型组、阳性药物组（1 µmol?L^-1地塞米松干预2 h）、洋甘菊活性组分组（200 µg?mL^-1，48 h）。Annexin V/PI结合流式细胞术检测各组的凋亡率。实时荧光PCR法和Western blot法检测Kif3a、SHH、Ptch1和Gli1的mRNA和蛋白表达变化。结果 LPS干预后，可显著降低16HBE活力（P < 0.05），并诱导其细胞凋亡（P < 0.01）。洋甘菊活性组分在浓度200 µg?mL^-1处理48 h时，可以显著逆转LPS对细胞的损伤并促进增殖（P < 0.01），减弱LPS诱导的细胞凋亡（P< 0.01）。与空白对照组比较，LPS诱导的16HBE内Kif3a在mRNA水平和蛋白表达水平显著降低（P < 0.05），SHH、Ptch1、Gli1在mRNA水平和蛋白表达水平显著升高（P < 0.05）；与LPS模型组相比较，洋甘菊活性组分处理后可显著逆转mRNA水平和蛋白表达（P< 0.05），增加Kif3a的mRNA水平和蛋白表达水平，并降低SHH、Ptch1、Gli1的mRNA水平和蛋白表达（P< 0.05）。结论 LPS诱导16HBE损伤，下调Kif3a水平从而上调SHH、Ptch1、Gli1水平，调控SHH信号通路处于异常激活状态。洋甘菊活性组分可显著逆转LPS诱导的细胞炎症损伤，上调Kif3a水平，下调SHH、Ptch1、Gli1水平，通过Kif3a调控SHH信号通路，对LPS诱导的16HBE发挥保护作用，改善哮喘气道炎症。

The protective effect and mechanism of the active components of Matricaria chamomilla L. on LPS-induced human bronchial epithelial cells