| CAR菌TaqMan MGB探针法实时荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用研究 |
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| 引用本文： | 高正琴,岳秉飞,关伟鸿. CAR菌TaqMan MGB探针法实时荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用研究[J]. 中国比较医学杂志, 2013, 23(8) |
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| 作者姓名： | 高正琴 岳秉飞 关伟鸿 |
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| 作者单位： | 中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院 |
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| 摘 要： | 目的 建立特异、敏感、快速检测CAR菌的TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法。方法 针对CAR菌16S rRNA基因序列设计特异性引物和探针，建立MGB探针荧光定量PCR方法，验证方法的特异性、敏感性和稳定性。对2008~2012年期间采集的1344份临床标本中的CAR菌进行检测，同时进行普通PCR检测作为对照。结果 CAR菌TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法具有高度特异性，与肺炎支原体、侵肺巴斯德菌、支气管鲍特杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希氏菌、肺炎链球菌间无交叉反应，检测灵敏度达2.7拷贝。标准曲线显示各浓度范围内具有良好线性关系，相关系数为0.999，斜率为-3.22，TaqMan MGB探针荧光定量PCR效率为104.432%。对1344份标本进行检测，结果TaqMan MGB探针荧光定量PCR检出510份CAR菌阳性样本。TaqMan MGB探针荧光定量PCR能够直接从标本中检出CAR菌DNA，检测时间仅为40分钟。结论 TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法具有可靠、特异、敏感的特点，适用于CAR菌的快速检测。
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| 关 键 词： | CAR菌；16S rRNA基因；小沟结合物探针；实时荧光定量PCR；快速检测 |
| 收稿时间： | 2013-05-09 |
| 修稿时间： | 2013-05-13 |
Development and application of TaqMan MGB probe real-time fluorescence quantitative PCR for rapid detection of Cilia-associated respiratory (CAR) bacillus |
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| gaozhengqin,Yue Bingfei and Guan Weihong. Development and application of TaqMan MGB probe real-time fluorescence quantitative PCR for rapid detection of Cilia-associated respiratory (CAR) bacillus[J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2013, 23(8) |
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| Authors: | gaozhengqin Yue Bingfei Guan Weihong |
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| Affiliation: | National Institutes for Food and Drug Control,National Institutes for Food and Drug Control,National Institutes for Food and Drug Control |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cilia-associated respiratory (CAR) bacillus 16S ribosomal RNA gene minor groove binder probe real-time fluorescence quantitative PCR rapid detection |
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