| 用生物化学方法从植物内生真菌提取液中高通量筛选细菌β-内酰胺酶抑制物 |
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| 引用本文： | 陈静,周杰,丁铁林,朱玉洁,陈才法,周生亮,孙东旭.用生物化学方法从植物内生真菌提取液中高通量筛选细菌β-内酰胺酶抑制物[J].中国抗生素杂志,2013,38(5):321-326,331. |
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| 作者姓名： | 陈静 周杰 丁铁林 朱玉洁 陈才法 周生亮 孙东旭 |
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| 作者单位： | 陈静(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)；周杰(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)；丁铁林(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)；朱玉洁(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)；陈才法(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)；周生亮(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)；孙东旭(江苏师范大学,江苏省药用植物生物技术重点实验室,徐州221116)； |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅国际合作项目基金(项目编号：SBZ200900212)江苏师范大学科研基金(项目编号：11XLA19)徐州市创新生物医药高技术重点实验室项目(项目编号：XF11C035) |
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| 摘 要： | 目的采用生物化学方法从植物内生真菌代谢物中筛选细菌β-酰胺酶抑制剂。方法克隆β-内酰胺酶KPC-2、TEM-10和NDM-1基因至表达载体pET28;纯化重组蛋白质,以此为药靶,从植物内生真菌代谢产物库中高通量筛选β-内酰胺酶抑制物;检测效应物对β-内酰胺类药物的增效效应。结果成功克隆了3个目的基因,纯化了重组蛋白质至纯度80-95%;从3752种真菌提取液中筛选确定了5个对3种纯化的β-内酰胺酶活性均有抑制的效应物,其中效应物PF000,212能够使美罗培南对3株携带NDM-1基因的临床分离"超级细菌"菌株的最低抑菌浓度降低8~16倍。结论以β-内酰胺酶为药靶,以植物内生真菌代谢物为材料,应用生物化学方法进行高通量筛选,是获得新型β-内酰胺酶抑制物的一条有效途径。
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| 关 键 词： | β-内酰胺酶抑制剂 KPC-2 NDM-1 植物内生真菌 生物化学筛选 |
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