VEGF受体KDR胞外Ⅴ～Ⅶ区的克隆、单抗制备及KDR在不同来源肿瘤组织中的表达

目的利用制备的血管内皮细胞增殖因子（ＶＥＧＦ）受体ＫＤＲ抗体，通过免疫组化，检测ＫＤＲ在不同来源肿瘤组织中的表达，为探讨ＶＥＧＦ及其受体对肿瘤生长及转移的作用提供可能。方法采用ＲＴＰＣＲ方法，从人胎儿脐静脉内皮细胞克隆ＫＤＲ胞外Ⅴ～Ⅶ区基因片段，在大肠杆菌中表达，并用传统的杂交瘤融合技术制备小鼠ＫＤＲ单克隆抗体。通过组化及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＫＤＲ单抗的特异性，最后采用ＳＰ免疫组化法，分别对不同来源的１１５例肿瘤组织及相应正常组织进行了ＫＤＲ表达分析。结果不同来源的肿瘤组织中，ＫＤＲ受体的表达率及强度存在差异，移行上皮来源的膀胱癌１００％表达ＫＤＲ，表达强度最高；乳腺癌及肠道腺癌细胞表达ＫＤＲ次之；肺鳞癌表达最弱。此外，肿瘤组织中不仅血管内皮细胞表达ＫＤＲ受体，且肿瘤细胞、血管平滑肌细胞及某些间质细胞也有ＫＤＲ表达，而相应正常组织中ＫＤＲ表达相对较弱。结论ＶＥＧＦ受体ＫＤＲ不仅表达于肿瘤血管内皮细胞，而且表达于肿瘤细胞，肿瘤细胞表达ＫＤＲ的强度与组织来源有关