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MSTN基因siRNA表达载体的构建和鉴定
引用本文:孙顺昌,林志坚,陈卫东,贺敬波,彭运生.MSTN基因siRNA表达载体的构建和鉴定[J].医学分子生物学杂志,2009,6(1).
作者姓名:孙顺昌  林志坚  陈卫东  贺敬波  彭运生
作者单位:1. 深圳市宝安区人民医院检验科,广东省深圳市,518101
2. 北京大学深圳医院神经内科,广东省深圳市,518036
3. 北京大学深圳医院检验科,广东省深圳市,518036
摘    要:目的 构建能沉默MSTN基因的小干扰RNA表达载体,并鉴定它沉默肌母细胞MSTN基因的效率.方法 合成3对发夹小干扰RNA模板寡核苷酸链,退火后插入pSilencer载体,构建成可沉默MSTN基因的小干扰RNA表达载体,通过酶切和测序鉴定构建的小干扰RNA表达载体.将小干扰RNA表达载体转染肌母细胞,用实时荧光定量RT-PCR和Western印迹检测转染的肌母细胞myostatin的表达水平.结果 酶切和测序证实3个小干扰RNA表达载体构建正确,实时荧光定量RT-PCR显示所构建的3个小干扰RNA表达载体对肌母细胞MSTN基因的干扰率分别为43.6 %、47.7 %和81.6 %,它们的干扰效果被Western印迹所证实.结论 干扰率为81.6 %的小干扰RNA表达载体为构建成功的小干扰RNA表达载体,它可用作MSTN基因的功能研究和肌病治疗的分子研究.

关 键 词:MSTN基因  RNA干扰  载体  构建

Construction and Identification of MSTN Gene siRNA Expression Vector
SUN Shunchang,LIN Zhijian,CHEN Weidong,HE Jingbo,PENG Yunsheng.Construction and Identification of MSTN Gene siRNA Expression Vector[J].Journal of Medical Molecular Biology,2009,6(1).
Authors:SUN Shunchang  LIN Zhijian  CHEN Weidong  HE Jingbo  PENG Yunsheng
Abstract:
Keywords:
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