“杜仲-当归”介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP-13表达防治关节炎的作用机制研究

目的 研究“杜仲-当归”介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP13表达防治骨性关节炎（osteoarthritis，OA）的作用机制。方法 取SD大鼠，随机分为Sham组、OA组、OA+补肾组（杜仲40 mg·kg^-1）、OA+活血组（当归40 mg·kg^-1）、OA+补肾活血组（杜仲-当归药液40 mg·kg^-1）、OA+阳性药物组（西乐葆10 mg·kg^-1+奥泰灵1.2 mg·kg^-1）共6组。OA模型制备成功后，各组大鼠给予对应药物治疗，连续给药8周。番红O染色检测软骨组织变化，免疫组织化学检测软骨组织中MMP-13表达，ELISA检测大鼠血清IL-6、IL-8含量，Western blotting检测软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、β-catenin蛋白表达。分离正常SD大鼠软骨细胞，IL-1β（10 ng·mL^-1）干预诱导体外OA炎症模型并进行药物干预。番红O染色检测软骨细胞表型变化，ELISA检测软骨细胞IL-6、IL-8含量，免疫荧光染色检测软骨细胞β-catenin表达，qRT-PCR检测软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP-3、MMP-9和MMP-13的mRNA表达，Western blotting检测软骨细胞中MMP-3、MMP-9、MMP-13、β-catenin蛋白表达。结果 药物处理对OA导致的软骨组织损伤有不同程度的修复作用；杜仲-当归可下调血清中IL-6、IL-8水平，下调软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、b-catenin的蛋白表达。与IL-1b组相比，杜仲-当归可提高软骨细胞存活率，改善细胞形态，下调软骨细胞IL-6、IL-8水平，降低软骨细胞中b-catenin荧光强度，并下调软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP-3、MMP-9、MMP-13的mRNA表达和MMP-3、MMP-9、MMP-13、b-catenin的蛋白表达。结论 体内、体外试验表明补肾活血中药“杜仲-当归”可以通过促进软骨细胞增殖、调控炎症因子水平、改善软骨基质降解、改善软骨病理损伤起到对OA的防治作用，且作用机制可能与介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP-13表达有关。