miR-221-3p靶向TIMP-2对腹主动脉瘤血管平滑肌细胞增殖、凋亡影响

目的分析miR-221-3p靶向基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)对腹主动脉瘤(AAA)血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响。方法对人VSMC细胞进行培养,10μmol/L血管紧张素(Ang Ⅱ)对VSMC进行处理,将VSMC细胞分为miR-221-3p inhibitor组(转染miR-221-3p inhibitor)、阴性对照组(转染miR-221-3p inhibitor NC)、空白组(未经转染的VSMC细胞),对照组(未进行Ang Ⅱ处理及转染的VSMC细胞),实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-221-3p、TIMP-2 mRNA的表达水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;蛋白印迹(WB)法检测增殖蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)及蛋白TIMP-2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-12的表达;双荧光素酶报告实验证明miR-221-3p与TIMP-2的靶向关系。结果与对照组比较,空白组、阴性对照组miR-221-3p表达、细胞凋亡率、蛋白Bax、MMP-2、MMP-12表达显著升高,TIMP-2 mRNA表达水平、细胞活力、蛋白β-catenin、CyclinD1、Bcl-2、TIMP-2表达显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);与空白组、阴性对照组比较,miR-221-3p inhibitor组miR-221-3p表达、细胞凋亡率、蛋白Bax、MMP-2、MMP-12表达显著降低,TIMP-2mRNA表达水平、细胞活力、蛋白β-catenin、CyclinD1、Bcl-2、TIMP-2表达显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。miR-221-3p靶向调控TIMP-2。结论 Mi R-221-3p可能靶向抑制TIMP-2的表达,抑制VSMC的增殖,促进其凋亡,进而参与AAA的发病。