TLR3配体polyI：C经TRIF／NF—KB途径抑制Bewo细胞中HBV复制

摘要：目的探讨T0Ⅱ样受体3（TLR3）配体聚肌苷酸胞苷酸（polyI：C）抑制人滋养层细胞Bewo中乙型肝炎病毒（HBV）复制的作用机制。方法首先将2斗g1．3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3．1（＋）-HBVl．3转染Bewo细胞，12h后，以TLR3配体polyI：C处理3d。然后以polyi：C处理Bewo细胞，观察IFN-B、TNF_d表达的动力学。最后，观察核因子-KB（NF-KB）拈抗剂PDTC对polyI：C诱导Bewo细胞产生细胞因子的作用。采用微粒子酶免疫分析法（MEIA）和荧光定量PCR法分别检测HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平，并以ELISA和RT-PCR分别检测IFN-B、TNF-Ⅸ水平及TIR结构域的转接蛋白（TRIF）、髓样分化蛋白88（MyD88）表达。结果与对照组比较，polyIC可显著抑制Bewo细胞中HBV复制，差异有统计学意义（P〈O．01），且polyI：C可显著诱导Bewo细胞产生IFN-p和TNF_d（P〈O．05），呈时间和剂量依赖性。PDTC可抑制polyhC诱导细胞产生TNF_Ot，显著低于对照组（P〈0．01），但对IFN-B无显著作用（乃0D5）。与对照组比较，polyI：c可诱导HBV重组质粒转染的Bewo细胞表达TRIFmRNA（P〈O．01）。结论TLR3配体poyZ：C可能通过rrRIF依赖性途径诱导Bewo细胞产生IFN-B和TNF-d，且TNF-a产生还涉及NF-KB途径，并最终抑制Bewo细胞中HBV复制。