hIFN-λ1基因在大肠杆菌中的表达及其对角膜基质细胞的抗病毒作用

目的获取重组人干扰素-λ1（hIFN-λ1）的原核表达产物并研究hIFN-λ1对兔角膜基质细胞的抗单纯疱疹病毒（HSV）作用。方法用含基因重组表达载体pGEX-4T-λ1的大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达和包涵体提取纯化后获取hIFN-λ1蛋白,采用微量滴定法测定其效价。采用组织块培养法培养兔眼角膜基质细胞,用微量细胞病变法比较hIFN-λ1、IFN-α标准品对兔眼角膜基质细胞的抗HSV作用。结果诱导含基因重组表达载体PGEX-4T-λ1的大肠杆菌BL21后,蛋白电泳显示出一条相对分子量约为33kd的蛋白条带;用IFN-α标准品校正其效价为62.5U/ml。hIFN-λ1抗HSV-I的作用与IFN-α相近,HSV-II的作用比IFN-α约弱50%。结论含基因重组表达载体pGEX-4T-λ1的大肠杆菌,经诱导表达和包涵体提取纯化后可获得hIFN-λ1,它对兔眼角膜基质细胞有一定的抗HSV作用。