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人乳头瘤病毒16型E5对人宫颈癌SiHa细胞恶性潜能的影响及其机制探讨
引用本文:廖书杰,邓东锐,夏曦,韩凌斐,胡晓继,白向阳,王薇,卢运萍,王世宣,马丁.人乳头瘤病毒16型E5对人宫颈癌SiHa细胞恶性潜能的影响及其机制探讨[J].中华医学杂志,2008,88(43).
作者姓名:廖书杰  邓东锐  夏曦  韩凌斐  胡晓继  白向阳  王薇  卢运萍  王世宣  马丁
作者单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,武汉,430030
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),国家自然科学基金 
摘    要:目的 通过构建和筛选持续表达HPV16E5的细胞SiHa/16E5,探讨HPV16E5对宫颈癌SiHa细胞的作用及机理.方法 利用pEGFP-C1构建HPV16型E5的正义全长真核表达载体并稳定转染SiHa细胞;利用RT-PCR和Western印迹技术检测转染前后E5和P21基因的mRNA和GFP+E5和P21蛋白的变化;利用MTT法检测SiHa细胞稳定转染后的增殖活性;利用软琼脂克隆形成和裸鼠成瘤实验分别在体内外验证了SiHa/16E5细胞的致瘤情况.结果 稳定转染携带.HPV16全长E5基因的质粒后,SiHa细胞中E5基因的mRNA和相应蛋白表达明显升高,而P21的表达则明显下调;MTT结果 显示稳定转染后细胞的增殖活性与转染空载体细胞和未转染细胞比较明显增高(P<0.05);软琼脂克隆形成结果 示:SiHa/16ES细胞组的可隆形成数为33.4±1.6,与空质粒对照组细胞(15.1±3.1)及未转染组细胞(16.3±2.5)比较差异有统计学意义(P<0.05);裸鼠成瘤实验结果 显示,4个实验组在共20 d的观察中,SiHa/16E5组裸鼠成瘤明显快于其他3个对照组(P<0.05).结论 HPV16 E5可降低宫颈癌SiHa细胞中P21的表达,加强宫颈癌SiHa细胞增殖和成瘤效应.

关 键 词:人乳头瘤病毒  宫颈癌  机制

Effects of human papillomavirus 16 E5 on malignancy of human cervical cancer cells and the mechanism there of
LIAO Shu-jie,DENG Dong-rui,XIA Xi,HAN Ling-fei,HU Xiao-ji,BAI Xiang-yang,WANG Wei,LU Yun-ping,WANG Shi-xuan,MA Ding.Effects of human papillomavirus 16 E5 on malignancy of human cervical cancer cells and the mechanism there of[J].National Medical Journal of China,2008,88(43).
Authors:LIAO Shu-jie  DENG Dong-rui  XIA Xi  HAN Ling-fei  HU Xiao-ji  BAI Xiang-yang  WANG Wei  LU Yun-ping  WANG Shi-xuan  MA Ding
Abstract:
Keywords:Human papillomavirus  Cervical cancer  Mechanism
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