| 摘 要： | 目的探究IL-32在气传过敏原诱导的固有免疫反应中的作用。方法将同一批次处在指数生长期的人支气管上皮细胞(16HBECs)随机分为4组,设置空白对照组(A组),不同浓度(B:2μg/mL, C:10μg/mL, D:20μg/mL)屋尘螨(house dust mite, HDM)稀释液组,B、C和D组均分别刺激16HBE细胞6、12和24 h。通过荧光定量PCR技术检测胞内IL-32、IL-8、TNF-α和NF-κB等炎症因子的mRNA表达水平;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中IL-32、IL-6、IL-8和IL-1β的水平;Western blotting法检测p-p38、p-p65、TLR-4等蛋白的表达,探究HDM刺激16HBE细胞后的炎症效应。结果与对照组相比,随着HDM浓度和刺激时长增加,高浓度实验组IL-32、IL-8、IL-1β、TNF-α、NF-κB等炎症因子mRNA表达水平显著升高(1.74±0.03,1.87±0.05,2.62±0.20,2.35±0.14, 1.40±0.07,P0.01);IL-32、IL-6、IL-8、IL-1β水平也出现分泌性上调(P0.05)。Western blotting结果显示,随着HDM浓度增加,p-p38和p-p65蛋白以及TLR-4表达均上调。结论HDM刺激16HBE细胞,会引起气道固有免疫效应,激发IL-32表达上调。IL-32可能通过TLR4/MD-2信号路径激活NF-κB信号通路,并与p38-MAPK通路发生交互作用产生促炎效应,导致过敏性气道炎症的发生与发展。
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