睫状神经营养因子和丹参注射液体外诱导肌源性干细胞向神经元样细胞的分化

背景：在干细胞异体移植时神经细胞的低存活率成为异体细胞移植失败的主要诱因。核因子κB是细胞信号传导的主要转录因子之一，参与细胞的增殖和分化过程。 目的：观察睫状神经营养因子和丹参注射液联合诱导肌源性干细胞向神经元样细胞的分化情况，以及分化过程中核因子κB的表达。 设计、时间及地点：细胞学基因水平实验，于2008-03/05在辽宁医学院附属第二医院口腔科学实验室完成。 材料：新生7 d龄SD乳鼠10只，由辽宁医学院实验动物中心提供。睫状神经营养因子为Sigma公司产品，丹参注射液购自正大青春宝药业有限公司。 方法：体外分离培养鼠肌源性干细胞，差速贴壁法和酶消化法纯化后接种于6孔板内，诱导组用含睫状神经营养因子的DMEM预诱导24 h，更换培养液，洗涤3次，再加入含丹参注射液的无血清DMEM诱导5 h；对照组使用无血清DMEM培养基处理。 主要观察指标：RT-PCR及Western blotting法检测神经丝蛋白、核因子κB抑制蛋白的表达。 结果：诱导前肌源性干细胞未见神经丝蛋白表达，诱导后的神经元样细胞神经丝蛋白呈阳性表达。凝胶电泳及Western blot检测结果显示，与诱导前比较，诱导后对照组核因子κB抑制蛋白的表达无明显变化，诱导组核因子κB抑制蛋白的表达明显下降。 结论：睫状神经营养因子和丹参注射液可联合诱导肌源性干细胞分化为神经元样细胞，分化过程中核因子κB的活化被抑制。

Differentiation of muscle-derived stem cells into neuron-like cells induced by ciliary neurotrophic factor and Compound Salvia Miltiorrhiza Injection in vitro