姜黄素调控转录因子FOXP3影响HIV-1感染辅助受体CCR5的作用机制研究 |
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作者姓名: | 冯龙 李青雅 李寒冰 王白燕 曹珊 郑文锦 耿宇轩 李青 |
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作者单位: | 河南中医药大学医学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81503677,81603607);;河南省自然科学基金项目(162300410189);;河南省高校重点科研项目(20A310008);;河南省科技攻关项目(232102310434); |
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摘 要: | 目的:探讨姜黄素通过调控转录因子FOXP3影响HIV-1感染辅助受体CCR5的作用机制。方法:利用生物信息学方法预测并分析转录因子FOXP3与CCR5启动子的结合位点;采用AutoDock 4.2软件对姜黄素与FOXP3进行柔性对接;MTT法检测姜黄素对Jurkat细胞活性的影响;qRT-PCR和Western blot检测不同浓度姜黄素作用于Jurkat细胞后CCR5和FOXP3 mRNA和蛋白表达水平;构建pcDNA3.1-FOXP3真核表达载体;结合转录因子预测结果,运用Overlap PCR法扩增突变型CCR5基因片段,构建突变型CCR5启动子报告载体pFireRluc-Mt-CCR5;利用双荧光素酶报告基因技术验证转录因子FOXP3与CCR5的启动子结合位点。结果:JASPAR转录因子预测结果显示,CCR5启动子区与转录因子FOXP3存在结合位点;分子对接结果显示,姜黄素能够与FOXP3的酶活区域结合;MTT结果显示,姜黄素作用24 h后对Jurkat细胞活性产生抑制作用,IC50为34.48μmol/L;qRT-PCR和Western bot结果显示,不同浓度姜黄素作用于J...
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关 键 词: | 姜黄素 FOXP3 CCR5 HIV-1 调控 |
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