TREM2单克隆抗体的制备及应用检测 |
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作者姓名: | 马宾 孟麟 戎卓娜 赵传科 寿成超 |
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作者单位: | 北京大学临床肿瘤学院,北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所,生物化学与分子生物学研究室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室 |
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摘 要: | 目的:制备TREM2特异性单克隆抗体并对其特异性、亲和力及在免疫学检测中的应用进行鉴定,为TREM2的抗体药物研发奠定基础。方法:表达并纯化TREM2胞外段GST融合蛋白,用其作为抗原免疫小鼠,筛选抗血清效价较高的小鼠,经过细胞融合和单克隆筛选,制备TREM2的特异性单克隆抗体。对获得的单克隆抗体的特异性、亲和力及其在免疫学实验中的应用进行检测。结果:获得了29株TREM2单克隆抗体,其中的24株可与TREM2特异性结合;29株单抗与TREM2结合的EC50均在nmol以上;它们可分别在Western blot、免疫沉淀、流式细胞术和免疫荧光中用于对TREM2的特异检测。结论:成功制备并获得了亲和力高、特异性好的抗TREM2单克隆抗体,为TREM2靶点的成药性抗体开发奠定了基础。
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关 键 词: | TREM2 单克隆抗体 制备 鉴定 |
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