| 抗人精浆蛋白单抗重链Fd段基因的克隆及其在HeLa细胞的表达 |
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| 引用本文： | 杨洁,郝晓柯,张盈华,孙脊峰,赵晶,金明,许彦鸣,王成济,杨安钢. 抗人精浆蛋白单抗重链Fd段基因的克隆及其在HeLa细胞的表达[J]. 医学争鸣, 2002, 23(17): 1551-1555 |
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| 作者姓名： | 杨洁 郝晓柯 张盈华 孙脊峰 赵晶 金明 许彦鸣 王成济 杨安钢 |
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| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西西安,710038;第四军医大学唐都医院肾脏内科,陕西西安,710038;第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西西安,710038;第四军医大学唐都医院肾脏内科,陕西西安,710038;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 |
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| 基金项目： | 国家“8 63”高技术计划资助项目 (2 0 0 1AA2 15 3 2 1)，教育部高等学校骨干教师资助计划资助 (2 0 0 0 -65 -66)，国家杰出青年科学基金资助项目 (3 992 5 0 3 6) |
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| 摘 要： | 目的：获得鼠抗人精浆蛋白mAb重链Fd段基因，并将其转染到HeLa细胞进行表达。方法：从分泌抗人精浆蛋白mAb的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA,用RT-PCR法获取重链Fd段cDNA，将其克隆入真核表达载体pcDNA3，用脂质体转染法转染HeLa细胞，并用免疫荧光染色方法检测重链Fd段的表达。结果：从分泌抗人精浆蛋白的鼠mAb杂交瘤细胞系E4B7中克隆出了重链Fd段基因，序列测定表明,VH与鼠免疫球蛋白MUSIGHAEI同源性最高。将含重链Fd段基因的真核表达载体pcDNA3-E4B7Fd中转染HeLa细胞后，在HeLa细胞中检测到了重链Fd段的表达。结论：获得了序列正确的重链Fd段基因，它在HeLa细胞中可以成功地表达，为进一步构建和表达Fab奠定基础。
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| 关 键 词： | 人精浆蛋白 单克隆抗体 免疫球蛋白重链Fd段 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)17-1551-05 |
| 修稿时间： | 2001-10-23 |
Cloning of heavy chain Fd gene of an anti-human-γ seminoprotein monoclonal antibody and its expression in HeLa cells |
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| YANG Jie ,,HAO Xiao Ke ,ZHANG Ying Hua ,SUN Ji Feng ,ZHAO Jing ,JIN Ming ,XU Yan Ming ,WANG Cheng Ji ,YANG An Gang Central Laboratory. Cloning of heavy chain Fd gene of an anti-human-γ seminoprotein monoclonal antibody and its expression in HeLa cells[J]. Negative, 2002, 23(17): 1551-1555 |
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| Authors: | YANG Jie HAO Xiao Ke ZHANG Ying Hua SUN Ji Feng ZHAO Jing JIN Ming XU Yan Ming WANG Cheng Ji YANG An Gang Central Laboratory |
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| Affiliation: | YANG Jie 1,2,HAO Xiao Ke 1,ZHANG Ying Hua 1,SUN Ji Feng 2,ZHAO Jing 3,JIN Ming 3,XU Yan Ming 3,WANG Cheng Ji 3,YANG An Gang 3 1Central Laboratory,2Department of Nephrology,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical |
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