了本血吸虫CuZn-SOD基因全长cDNA的识别及真核表达载体的构建

目的 识别日本血吸虫大陆株铜锌超氧化物歧化酶(Sj CuZn-SOD)基因，构建Sj CuZn-SOD的真核表达载体。方法 将曼氏血吸虫(Sm)的CuZn-SOD全长cDNA序列上网比对，寻找Sj相关EST。设计特异性引物从尾蚴cDNA文库扩增相应序列，经双酶切、连接、转化，克隆入pcDNA3.0真核表达质粒，并鉴定阳性克隆。结果 找到Sj相关EST(登录号BU794891)，核酸阅读框(ORF)分析和BLAST比对分析等方法判断为Sj CuZn-SOD完整的cDNA编码序列，含462 bp完整阅读框，编码154aa。经单双酶切、PCR扩增、核酸测序鉴定，验证成功构建了pcDNA 3．0-SOD真核重组表达载体。结论 成功构建真核重组表达载体pcDNA3．0-SOD，为在真核表达系统研究Sj CuZn-SOD基因功能奠定了基础。