| 基于增殖诱导配体新型抗肿瘤分子的构建及初步筛选 |
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| 引用本文： | 高全胜,黄复生,何凤田.基于增殖诱导配体新型抗肿瘤分子的构建及初步筛选[J].第三军医大学学报,2005,27(13):1317-1319. |
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| 作者姓名： | 高全胜 黄复生 何凤田 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础医学部,病原生物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部,生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的构建针对APRIL的免疫抑制分子,并对其原核表达蛋白进行纯化及活性筛选.方法将可溶性增殖诱导配体(sAPRIL)cDNA进行突变并插入TEL Th表位序列,突变体用pQE-80L/DH5α原核表达系统进行表达,表达蛋白经SDS-PAGE鉴定、Ni-NTA亲和层析纯化及Western印迹分析,最后检测纯化蛋白对Raji细胞增殖的影响.结果成功构建并表达了4种sAPRIL突变体:C端引入HEL Th表位的sAPRIL突变体(Ⅰ)、N端引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅱ)、C端缺失45bp序列并引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅲ)、N端缺失45 bp序列并引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅳ).SDS-PAGE电泳、Western印迹分析均检测到相应的特异蛋白带.用Ni-NTA系统成功纯化表达的突变体蛋白.细胞试验表明,突变体Ⅰ、Ⅱ纯化蛋白具有明显的促细胞增殖活性,而突变体Ⅲ、Ⅳ纯化蛋白没有促细胞增殖活性.结论在4种sAPRIL突变体中初步筛选到不具有促细胞增殖活性的APRIL免疫抑制分子,为下一步确定该分子的免疫抑制功能奠定了物质基础.
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| 关 键 词： | sAPRIL 突变体 表达 免疫抑制 |
| 文章编号： | 1000-5404(2005)13-1317-03 |
| 修稿时间： | 2005年1月6日 |
Construction and screening of anti-tumor molecule based on a proliferation-inducing ligand |
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| GAO Quan-sheng,HUANG Fu-sheng,HE Feng-Tian.Construction and screening of anti-tumor molecule based on a proliferation-inducing ligand[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2005,27(13):1317-1319. |
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| Authors: | GAO Quan-sheng HUANG Fu-sheng HE Feng-Tian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sAPRIL |
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