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RNA干扰选择性下调心肌细胞血管紧张素Ⅱ受体AT1a
作者姓名:张敬群  王勇  马业新  汪道文
作者单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科,湖北,武汉,430030
摘    要:目的用RNA干扰技术选择性下调乳鼠心肌细胞上血管紧张素Ⅱ1a型受体(AT1aR)的表达.方法用携带U6启动子和AT-1a特异性短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pAT1a-shRNA1, pAT1a-shRNA2,及含非特异性shRNA编码序列的对照质粒pGenesil-Con(pCon),转染原代培养的乳鼠心肌细胞,通过半定量RT-PCR和Western-blot法检测AT1a,AT2受体的表达情况,以内参照β-actin进行标化.结果 pAT1-shRNA1使AT1a的mRNA和蛋白质表达分别降低70%和67%,pAT1a-shRNA2使之分别降低66%和52%,转染对照质粒组较空白对照组AT1a受体表达及各组AT2受体表达无显著差异.结论 RNA干扰技术能选择性下调乳鼠心肌细胞AT1a受体的表达,为心血管疾病基因治疗的研究提供了新的思路.

关 键 词:血管紧张素受体1型  RNA干扰  质粒  转染  心肌细胞
修稿时间:2005-07-11
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