| 体外高磷环境下血管平滑肌细胞转分化过程的研究 |
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| 引用本文： | 王宁宁,王笑云,杨俊伟,邢昌赢,居小兵,孙彬,周书琴,闻萍,熊明霞.体外高磷环境下血管平滑肌细胞转分化过程的研究[J].中华肾脏病杂志,2009,25(2):116-121. |
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| 作者姓名： | 王宁宁 王笑云 杨俊伟 邢昌赢 居小兵 孙彬 周书琴 闻萍 熊明霞 |
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| 作者单位： | DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2009.02.010 基金项目：国家自然科学基金（30700368）；江苏省卫生厅“135医学工程”科研基金；江苏省自然科学基金青年科技创新人才启动项目（BK2007609） 作者单位：210029 南京医科大学第一附属医院肾内科（王宁宁、王笑云、邢昌赢、孙彬），泌尿外科（居小兵）；南京医科大学第二附属医院肾脏病研究中心（杨俊伟、周书琴、闻萍、熊明霞） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省卫生厅135医学工程科研基金，江苏省自然科学基金青年科技创新人才启动项目 |
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| 摘 要： | 目的 观察体外高磷培养条件下，血管平滑肌细胞（VSMC）向类似成骨样细胞转分化的动态变化特点。 方法 Western印迹和免疫荧光法观察不同磷浓度（1.0、2.5、3.5 mmol/L）培养条件下，人VSMC的标志蛋白α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以及成骨细胞特异性的核转录因子Cbfα1、相关骨基质蛋白（骨桥蛋白、I型胶原和骨钙素）的动态变化过程。实时荧光定量PCR法分析上述指标的基因表达水平。在此基础上，以硝酸银染色和茜素红染色了解细胞的钙盐沉积状况，最后通过电镜观察不同培养条件下细胞超微结构的改变。 结果 在无血清的培养条件下，高磷（2.5、3.5 mmol/L）刺激细胞12 h时，胞内 Cbfα1的表达就明显增加（P ＜ 0.05）；3 d后高磷组（2.5、3.5 mmol/L）细胞中I型胶原和骨桥蛋白的含量显著上调（均P ＜ 0.05）；第6天骨钙素的产生开始增加；15 d时高磷组（2.5、3.5 mmol/L）α-SMA的含量才显著下降（P ＜ 0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，高磷环境培养1 d时，细胞中骨桥蛋白、I型胶原的mRNA水平显著升高（均P ＜ 0.05）；5 d时骨钙素的mRNA表达显著增加（P ＜ 0.05）；10 d时α-SMA的mRNA含量显著减少（P ＜ 0.05）。在高磷营养液中培养15 d时，细胞出现多处斑片状的钙盐沉积。电镜可见胞质内产生大量胶原纤维和钙化的基质囊泡。 结论 高磷可诱导VSMC向类似成骨样细胞转分化，这是一个复杂的、有多个环节、有序的动态变化过程。
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| 关 键 词： | 肌细胞平滑肌钙质沉着症肌平滑血管磷 |
Vascular smooth muscle cells transformation induced by high phosphate enviroment in vitro |
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| WANG Ning-ning,WANG Xiao-yun,YANG Jun-wei,XING Chang-ying,JU Xiao-bing,SUN Bin,ZHOU Shu-qin,WEN Ping,XIONG Ming-xia.Vascular smooth muscle cells transformation induced by high phosphate enviroment in vitro[J].Chinese Journal of Nephrology,2009,25(2):116-121. |
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| Authors: | WANG Ning-ning WANG Xiao-yun YANG Jun-wei XING Chang-ying JU Xiao-bing SUN Bin ZHOU Shu-qin WEN Ping XIONG Ming-xia |
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| Institution: | *Department of Nephrology, the First Affiliated Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Myocytes smooth muscle Caleinosis Muscle smooth vascular Phosphorus |
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