| 人MAGE-1基因的克隆、原核表达及其抗体的制备 |
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| 引用本文： | 叶菁,陈广生,黄亚渝,宋宏萍,张秀敏,隋延仿.人MAGE-1基因的克隆、原核表达及其抗体的制备[J].免疫学杂志,2004,20(4):259-262. |
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| 作者姓名： | 叶菁 陈广生 黄亚渝 宋宏萍 张秀敏 隋延仿 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 2 71 4 64)，全军医药卫生科研基金 (0 1Z0 84)重点资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 获得MAGF-1蛋白，制备其多克隆抗体。方法 采用RT-PCR方法从人肝细胞癌HepG2中克隆MAGE-1基因，构建其原核表达质粒，并进行原核表达与蛋白分离纯化。免疫动物，制备MAGE-1的抗血清。经固化GST蛋白的Sephamse 4B交叉吸收后，采用琼脂双扩实验和ELISA方法检测其效价和特异性。结果 所得MAGE-1 cDNA序列与GeneBank中公布的一致。构建了MAGE-1194-309 aa片段的原核表达质粒pGEX-MAGE-1，经诱导及分离纯化，得到-M1约42000的融合蛋白。免疫动物，分离血清，经交叉吸收后，琼脂双扩及ELISA实验结果显示多克隆抗体能够与MAGE-1蛋白特异性结合。结论本研究成功地获得MAGE-1蛋白，制备的抗MAGE-1多克隆抗体，经交叉吸收后能够特异性地与MAGE-1蛋白结合，为研究MAGE-1在肿瘤诊断和免疫治疗中的应用提供了实验条件。
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| 关 键 词： | 黑色素瘤抗原-1 克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-8861(2004)04-0259-04 |
| 修稿时间： | 2004年1月4日 |
Cloning,prokaryotic expression,and antibody preparation of human MAGE-1 |
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| YE Jing,CHEN Guang-sheng,HUANG Ya-yu,SONG Hong-ping,ZHANG Xiu-min,SUI Yan-fang.Cloning,prokaryotic expression,and antibody preparation of human MAGE-1[J].Immunological Journal,2004,20(4):259-262. |
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| Authors: | YE Jing CHEN Guang-sheng HUANG Ya-yu SONG Hong-ping ZHANG Xiu-min SUI Yan-fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Melanoma antigen-1 Cloning Prokaryotic expression |
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