HLA-A*02/24限制的HBcAg表位特异性细胞毒T细胞克隆的建立及分析 |
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作者姓名: | 唐祖明, 郑纪山, 张胜子, 杨玉志, 张益红 |
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作者单位: | [1]东南大学生物电子学国家重点实验室,江苏南京210096; [2]南京军区军事医学研究所,江苏南京210002; [3]南京大学附属鼓楼医院,江苏南京210008; [4]南京红十字血液中心,江苏南京210003 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30671929). |
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摘 要: | 目的建立HLA-A*0201/2403限制的HBcAg表位特异性CTL细胞克隆。方法HLA-A*0201/2403阳性HBV感染者的外周血单个核细胞(PBMC)分别用限制性表位肽HBc18-27和HBc117-125刺激,并以有限稀释法进行克隆化,期间单独使用植物血凝素(PHA)及联合使用表位肽刺激。用免疫荧光、流式细胞术以及乳酸脱氢酶释放实验对所获克隆进行鉴定。结果从HBc18-27活化的细胞中获得29株细胞克隆,其中28株为CD8^+T克隆,均具有特异性细胞毒活性。从HBc117-125激活的细胞中获得12株CD8+T克隆,其中9株有明显的细胞毒活性,另3株细胞毒活性则显著低下。克隆化过程中单独使用PHA及联合使用表位肽,克隆形成率分别为15.62%和14.58%。结论分别用表位肽HBc18-27和HBc117-125,能激活HLA-A*0201/2403阳性HBV感染者的CD8^+T细胞。建立CD8^+T克隆过程中,表位肽的使用不能提高克隆形成率。
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关 键 词: | HBV感染 细胞毒T细胞 细胞克隆 表位 |
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