小RNA干扰对高表达RegIα基因胃癌细胞株增殖的影响 |
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作者姓名: | 陆晓凤 王良静 周群燕 姒健敏 |
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作者单位: | 1. 浙江大学邵逸夫临床医学研究所胃肠病实验室、浙江省生物治疗重点实验室,浙江,杭州,310006 2. 浙江大学医学院附属第二医院消化科,浙江,杭州,310009 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金(Y206280); 浙江省教育厅科研项目(Y20070071) |
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摘 要: | 目的:探讨小RNA干扰(small interfering RNA,RNAi)对胃癌细胞株RegIα基因表达的抑制作用及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:RT-PCR检测6株胃癌细胞的RegIα基因mRNA表达水平;体外构建RegIα基因小RNA干扰的重组质粒,分别稳定转染RegIα高表达细胞株MKN45和AGS,并设空载体作为对照组;应用RT-PCR和Western blot测定转染后细胞RegIα基因及其蛋白的表达水平;应用MTT法和流式细胞仪检测RegIα小RNA干扰对细胞增殖抑制率和凋亡的影响。结果:RT-PCR显示:与空载体组相比,转染RegIα小RNA干扰质粒后,MKN45和AGS细胞的RegIαmRNA明显被抑制;Western blot结果显示:MKN45和AGS细胞的RegIα蛋白表达水平分别降低至空载体组的(44±4)%和(25±4)%;MTT结果显示:RegIα小RNA干扰后MKN45和AGS细胞增殖均受到抑制,凋亡率分别为(12.96±0.50)%和(11.59±1.10)%,与空载体组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小RNA干扰可有效抑制胃癌细胞株中RegIα基因的表达,具有抑...
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关 键 词: | RNA 小分子干扰 再生/遗传学 基因表达 胃肿瘤 遗传载体 质粒 细胞凋亡 细胞增殖 转染 |
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