通痹灵总碱对胶原诱导型关节炎大鼠软骨及其细胞代谢的影响

背景：中医对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)的认识和治疗积累比较丰富的经验，尤其是经过近几年来的研究，取得了令人瞩目的进展，具有治疗方法多，疗效确切，毒副作用少的特点，因而从中医领域进一步探寻治疗RA更为有效的药物和方法，有着重要的科学意义和社会意义。而中药能否在RA发病中通过多途径、多靶点、多环节作用方式，抑制或阻止软骨和骨的破坏并促进他们的新陈代谢及其损伤的修复的研究更是少有报道。目的：探讨中药通痹灵抗软骨破坏的作用机制。设计：以实验动物为研究对象的完全随机设计，对照实验研究。单位：一所大学金匮教研室。材料：实验于2002—08／2003—12在广州中医药大学第一附属医院综合实验室完成。Wistar清洁级大鼠，雌性，体质量(110&;#177;20)g，35只。由解放军第一军医大学动物实验室提供，动物合格证号：2002A041。将Wistar大鼠适应性喂养3d后，随机分为正常组、造模组、通痹灵总碱组。通痹灵总碱由广州中医药大学热带病研究所植物化学分析室提取。方法：以胶原诱导型关节炎大鼠为动物模型，分组灌胃治疗后，做大鼠趾关节病理切片，常规苏木精．伊红染色，观察软骨病变；培养软骨细胞，以rrIL-1β体外刺激软骨细胞导致软骨细胞基质降解作为药理模型，加用不同浓度的通痹灵总碱，并以地塞米松作为对照组，培养48h后，收集细胞上清液，用阿利新兰法检测GAG含量；用硝酸酶还原法检测一氧化氮的含量。主要观察指标：①主要结局：通痹灵总碱对胶原诱导型关节炎大鼠趾关节软骨病变及对rrIL-1β诱导的软骨细胞基质降解的影响②次要结局：通痹灵总碱对rrIL-1β诱导的软骨细胞生成一氧化氮的影响。结果：①趾关节病理苏木精-伊红染色切片评价结果显示：通痹灵总碱组软骨破坏程度小于造模组(P&;lt;0．01)；②不同浓度的rrIL-1β(1，10，100，500，1000μg／L)促进了软骨细胞蛋白多糖的降解(P&;lt;0．01)，且呈量效关系。③不同浓度的通痹灵总碱(200，100，50，25mg／L)及地塞米松可明显抑制软骨细胞蛋白多糖的降解(P&;lt;0．01)及一氧化氮的产生(P&;lt;0．01)。结论：通痹灵总碱可抑制胶原诱导型关节炎大鼠趾关节软骨破坏；体外实验结果显示通痹灵总碱可对抗软骨细胞蛋白多糖的降解，其作用途径可能是通过抑制一氧化氮的生成来实现的。