| 人TLR1胞外段原核表达载体的构建、蛋白表达及纯化 |
| |
| 引用本文： | 年四季,李祥,黄黎,曹新梅,周云刚,袁青.人TLR1胞外段原核表达载体的构建、蛋白表达及纯化[J].中国免疫学杂志,2010,26(12). |
| |
| 作者姓名： | 年四季 李祥 黄黎 曹新梅 周云刚 袁青 |
| |
| 基金项目： | 四川省教育厅青年基金，四川省卫生厅科研基金资助项目，泸州医学院课题 |
| |
| 摘 要： | 目的:克隆、原核表达人Toll-like receptor1 (TLR1)胞外段基因,获得人TLR1胞外段蛋白.方法:RT-PCR扩增人TLR1胞外段基因,构建pET30(a)+/TLR1表达质粒,转染大肠杆菌BL21,在BL21细胞中表达TLR1胞外段蛋白,并进行纯化和Western blot 鉴定.结果:PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pET30(a)+/TLR1胞外段原核表达质粒,PCR扩增的目的基因大小为1 700 bp左右.表达的包涵体蛋白经溶解及变性后上镍亲和柱纯化,SDS-PAGE分析纯化产物在Mr为68 kD处有明显蛋白条带;Western blot ELISA结果显示,其表达纯化的蛋白为TLR1蛋白.结论:TLR1胞外段在大肠杆菌BL21中正确表达,为TLR1识别机制及信号转导机制研究奠定了基础.
|
| 关 键 词： | TLR1 原核表达 纯化 |
Construction of prokaryotic expression vector:inducing expression and purification of TLR1 |
| |
| NIAN Si-Ji,LI Xiang,HUANG Li,CAO Xin-Mei,ZHOU Yun-Gang,YUAN Qing.Construction of prokaryotic expression vector:inducing expression and purification of TLR1[J].Chinese Journal of Immunology,2010,26(12). |
| |
| Authors: | NIAN Si-Ji LI Xiang HUANG Li CAO Xin-Mei ZHOU Yun-Gang YUAN Qing |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
