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变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
引用本文:童忠春,马丽芳,倪龙兴,侯波.变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建[J].实用口腔医学杂志,2008,24(2):182-185.
作者姓名:童忠春  马丽芳  倪龙兴  侯波
作者单位:西安第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科,710032
摘    要:目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除.方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到luxS基因上下游序列,最后将这3 段DNA片断分别按顺序插入到pMD19-T载体的多克隆酶切位点中,转化大肠杆菌的感受态中,通过在卡那霉素和氨苄青霉素的培养基进行筛选.结果:kana 基因和luxS基因两侧同源序列成功连入到pMD19-T载体相应酶切位点,酶切、测序结果正确.结论:成功构建变异链球菌luxS基因敲除重组质粒,为将来构建变异链球菌luxS突变株打下基础.

关 键 词:变异链球菌  luxS基因  pMD19-T载体  pEGFP-N1质粒  pMD19-TUKD  变异链球菌  基因敲除  重组质粒  recombinant  plasmid  Construction  gene  突变株  测序  酶切位点  结果  筛选  培养基  氨苄青霉素  抗卡那霉素  感受态  转化大肠杆菌  多克隆  载体  同源序列  模板
文章编号:1001-3733(2008)-02-0182-04
修稿时间:2007年9月24日

Construction of a recombinant plasmid for S.mutants luxS gene knock-out
TONG Zhongchun,MA Lifang,NI Longxing,HOU Bo.Construction of a recombinant plasmid for S.mutants luxS gene knock-out[J].Journal of Practical Stomatology,2008,24(2):182-185.
Authors:TONG Zhongchun  MA Lifang  NI Longxing  HOU Bo
Abstract:
Keywords:
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