GLP-1对GK糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化能力的影响

目的 观察胰高血糖素样肽-l( Glucagon-like peptide-I，GLP-l)对Goto-Kakizaki鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow stromal cell，BMSCs)成骨分化能力的影响，并讨探其可能作用机制。方法 贴壁法取8周龄GK鼠BMSCs，逆转录PCR法验证BMSCs表达GLP-1受体，MTT法筛选GLP-1对GK鼠BMSCs的最佳刺激浓度，选取该浓度干预GK鼠BMSCs，观察其成骨分化相关指标：第7 d、14 d测定碱性磷酸酶活性，第14d应用实时定量PCR检测ALP、RUNX2、OCN、Smad1、β-catenin、OPG和 RANKL的表达。结果 1. GK鼠BMSCs中存在GLP-1受体;2. 20 nmol/L的GLP-1对细胞刺激作用最佳;3.成骨诱导后ALP 活性升高。成骨诱导7 d，诱导组和GLP-1干预组的ALP活性相对于对照组均明显升高(P <0. 05);成骨诱导14 d，诱导组和 GLP-1干预组的ALP活性进一步升高（与自身7d时相比，P <0.05)，且均高于对照组(P <0. 05); GLP-1干预组ALP活性在第 7d时稍高于诱导组(P >0. 05)，第14d时明显高于诱导组(P <0. 05) ；4.与正常成骨诱导组相比，GLP-1干预组ALP和RUNX 2表达量均明显增加(P <0.5)，OCN的表达量增加，但无统计学意义。GLP-1干预组表达Smad1减少（P > 0. 05)，β-catenin 明显增多（P <0.05)。GLP-1干预组表达 OPG增加（P >0.05)，RANKL 减少（P <0. 05)，OPG/RANKL 升高（P <0.05)。结论 1. GK鼠BMSCs上存在GLP-1受体;2. GLP-1可促进GK鼠BMSCs向成骨细胞分化，并调节Wnt通路部分基因的表达及OPG/RANK/RANKL轴的动态平衡。

Effect of GLP-1 on the osteogenic differentiation by bone mesenchymal stem cells in Goto-Kakizaki rats