| 摘 要： | 目的探讨锰对小鼠黑质GSH(glutathione)合成相关酶γ-GCS(γ-glutamylcysteine synthetase)和GSS(glutathione synthetase)的影响,为锰中毒机制的研究提供依据。方法小鼠64只,雌雄各半,依体重随机分为4组,每组16只,第1组为对照组,第2~4组分别为低、中、高剂量染锰组。第1组腹腔注射0.9%氯化钠,第2~4组分别腹腔注射12.5、25、50 mg/kg Mn Cl2,注射剂量为5 ml/kg,每天染毒1次,持续2周。最后一次染毒24 h后,将小鼠用水合氯醛麻醉后快速处死,冰浴条件下分离脑组织并取黑质;HE染色和透射电镜观察黑质组织形态及超微结构,Neu N和GFAP荧光双染观察神经元和星形胶质细胞分布及数量变化,试剂盒检测黑质内GSH含量,Western blotting法检测γ-GCS和GSS蛋白水平。结果随着各组染锰浓度升高,黑质组织形态和超微结构损伤逐渐加剧;免疫荧光发现胶质细胞增多,神经元减少;黑质内GSH水平下降,中剂量染锰组下降了53.82%,高剂量染锰组下降了68.36%;γ-GCS和GSS蛋白表达水平下降,其中γ-GCS在中、高剂量染锰组分别下降了7.8%、28.9%,GSS在中、高剂量染锰组分别下降了12.94%、32.94%。结论锰可通过干扰GSH合成相关酶γ-GCS和GSS的表达,影响GSH的合成,产生神经毒性。
|
