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健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP- 9mRNA表达的影响
引用本文:张媛媛 何嘉承 林煜 张文明 黄云梅 吴银生 陈翔 贾晓康 林燕萍. 健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP- 9mRNA表达的影响[J]. 中国骨质疏松杂志, 2015, 0(12): 1436-1,440
作者姓名:张媛媛 何嘉承 林煜 张文明 黄云梅 吴银生 陈翔 贾晓康 林燕萍
作者单位:1.福建中医药大学,福州3501222.厦门大学附属福州第二医院,福州350007
基金项目:国家自然科学基金课题(81173282);福建省科技厅资助课题(2015Y0069)
摘    要:目的 通过观察补肾健脾中药健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达的影响,进一步揭示健骨颗粒有效防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法 用M-CSF和RANKL诱导破骨前体细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞,alamar Blue法检测破骨细胞血清干预的最佳浓度,于破骨细胞培养第7天开始干预,分别用25%浓度的健骨颗粒含药血清和25%浓度的生理盐水血清干预,培养48小时后抽提总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量SYBR GREEN法检测CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,计算分析骨陷窝数和骨吸收面积,同时运用氧化显色法检测破骨细胞培养液中TRAP含量,ELISA法检测骨磨片培养液中CTX含量。结果 健骨颗粒含药血清组破骨细胞CA Ⅱ、 CK、MMP-9mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P <0. 05),含药血清组骨磨片的骨陷窝数和骨吸收面积以及TRAP和 CTx含量均低于生理盐水血清组(P<0.05)。结论 健骨颗粒能有效抑制破骨细胞CAII、CK、MMP-9mRNA表达,降低破骨细胞功能活性,抑制破骨细胞对骨基质的分解,从而抑制骨吸收。

关 键 词:中药;健骨颗粒  骨质疏松  破骨细胞;骨吸收;II型碳酸酐酶;组织蛋白酶K  基质金属蛋白酶-9

Effect of Jiangu granule containing serum on the mRNA expression of CA 11/ CK/ MMP-9 in osteoclasts in vitro
ZHANG Yuanyuan,HE Jiacheng,LIN Yu,ZHANG Wenming,HUANG Yunmei,WU Yinsheng,CHEN Xiang,JIA Xiaokang,LIN Yanping. Effect of Jiangu granule containing serum on the mRNA expression of CA 11/ CK/ MMP-9 in osteoclasts in vitro[J]. Chinese Journal of Osteoporosis, 2015, 0(12): 1436-1,440
Authors:ZHANG Yuanyuan  HE Jiacheng  LIN Yu  ZHANG Wenming  HUANG Yunmei  WU Yinsheng  CHEN Xiang  JIA Xiaokang  LIN Yanping
Affiliation:1.Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 3501222.Xiamen University Affiliated Fuzhou Second Hospital, Fuzhou 350007, China
Abstract:
Keywords::Chinese medicine  Jiangu Granule  Osteoporosis  Osteoclast   Bone resorption   Carbonic Anhydrsae II  Cathepsin K  Matrix metalioproteinases-9
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