| 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、原代培养与鉴定 |
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| 引用本文： | 陈慧,王振花,张建平,杨冬梓. 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、原代培养与鉴定[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2006, 27(5): 496-499 |
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| 作者姓名： | 陈慧 王振花 张建平 杨冬梓 |
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| 作者单位： | 中山大学附属第二医院妇产科,广东,广州,510120 |
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| 摘 要： | 【目的】探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法，建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型，为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段。【方法】采用低浓度胰酶消化20d胎鼠肺组织，经差速离心和特异性免疫吸附后，分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞，进行原代培养；根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白A的分泌，用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定。【结果】原代培养的肺Ⅱ型细胞12h开始贴壁，外观呈多边形，岛状生长。培养的24～48h，细胞连接成单层，胞浆内颗粒明显，培养的6～7d细胞内颗粒大量减少；免疫细胞化学鉴定细胞肺表面活性特异蛋白A（surfactant pmtein A，SP-A）染色阳性，透射电镜可见观察到细胞内板层小体，培养液中SP-A含量随培养时间延长逐渐增多，于培养36h达峰值，为80ng／mL；细胞纯度达（92±2）％，产量为（18．6±7）×10^6。【结论】差速离心和免疫黏附法是一种高效的分离和纯化胎肺Ⅱ型细胞的方法，所得细胞产量大、纯度高，可以用于体外研究肺泡Ⅱ型细胞和晚期胎肺发育的研究.
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| 关 键 词： | 胎鼠 肺泡Ⅱ型细胞 原代培养 分离 鉴定 |
| 文章编号： | 1672-3554(2006)05-0496-04 |
| 收稿时间： | 2006-03-05; |
| 修稿时间： | 2006-03-05 |
An Enhanced Method for Isolation, Primary Culture, and Identification of Type Ⅱ Alveolar Epithelial Cells from Fetal Rats |
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| CHEN Hui,WANG Zhen-hua,ZHANG Jian-ping,YANG Dong-zi. An Enhanced Method for Isolation, Primary Culture, and Identification of Type Ⅱ Alveolar Epithelial Cells from Fetal Rats[J]. Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences), 2006, 27(5): 496-499 |
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| Authors: | CHEN Hui WANG Zhen-hua ZHANG Jian-ping YANG Dong-zi |
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