RNA干扰抑制环氧化酶-2表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响 |
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引用本文: | 徐慧婷,于世英,翁丹卉,庄亮. RNA干扰抑制环氧化酶-2表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响[J]. 华中科技大学学报(医学版), 2009, 38(1). DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2009.01.015 |
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作者姓名: | 徐慧婷 于世英 翁丹卉 庄亮 |
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作者单位: | 1. 湖北省肿瘤医院内科,武汉,430079 2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科,武汉,430030 3. 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,武汉,430030 |
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摘 要: | 目的 建立以小分子干扰RNA(siRNA)抑制环氧化酶-2(COX-2)表达的宫颈癌HeLa细胞模型,探讨COX-2在肿瘤细胞增殖、凋亡方面的作用和可能机制.方法 构建靶向抑制COX-2的siRNA表达载体,转染HeLa细胞,Western blot法确定筛选的稳定表达siRNA的转化克隆COX-2表达受抑制;流式细胞仪检测RNA干扰(RNAi)抑制COX-2表达后细胞凋亡和细胞周期的变化;克隆形成试验检测细胞克隆形成率;RT-PCR及Western blot法检测ku70、ku80的表达变化.结果 获得稳定表达siRNA的转化细胞株(HeLa/COX-2i),其COX-2蛋白表达明显受抑制,而转入阴性对照质粒的细胞株(HeLa/Negi)COX-2蛋白表达不受影响;HeLa/COX-2i细胞的克隆形成率[(45±4)%]显著低于HeLa细胞[(85±7)%](P<0.01);HeLa,HeLa/Negi,HeLa/COX-2i 3株细胞的细胞周期分布以及细胞凋亡率差异无显著性意义;RT-PCR及Western blot显示RNAi抑制COX-2表达后ku70、ku80在转录和翻译水平均受抑制.结论 RNAi抑制COX-2表达后可抑制HeLa细胞增殖,其机制可能与ku70、ku80的表达下调有关.
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关 键 词: | 环氧化酶-2 小分子干扰RNA HeLa细胞 细胞增殖 细胞周期 |
Effect of COX-2 Expression Inhibition by RNA Interference on Proliferation of Cervical Carcinoma Cell Line HeLa |
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Abstract: | |
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