| 以寡聚精氨酸为PTD的嵌合基因的表达及其对HER2阳性SGC-7901胃癌细胞的杀伤作用 |
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| 引用本文： | 赵智凝,王涛,任君琳,张瑞,赵晶,温伟红,贾林涛,杨安钢.以寡聚精氨酸为PTD的嵌合基因的表达及其对HER2阳性SGC-7901胃癌细胞的杀伤作用[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(8). |
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| 作者姓名： | 赵智凝 王涛 任君琳 张瑞 赵晶 温伟红 贾林涛 杨安钢 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)资助项目，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建以寡聚精氨酸(R9)为蛋白质转导结构域的嵌合抗体/caspase-3的真核表达载体,并检测瞬时转染该载体对HER2阳性SGC-7901肿瘤细胞及HER2阴性HeLa肿瘤细胞生长的影响。方法:用PCR法获得融合了R9的活性caspase-3基因片段,并将其克隆入含有HER2单链抗体e23sFv基因的真核表达载体,以脂质体法转染SGC-7901细胞及HeLa细胞,用间接免疫荧光、细胞计数等方法,检测其在两种细胞中的表达及其对两种细胞生长的影响。结果:成功构建了以R9为蛋白质转导结构域的嵌合抗体/caspase-3基因真核表达载体pCMV-e23sFv-R9-casp3,瞬时转染该质粒发现SGC-7901细胞和HeLa细胞均以分泌形式表达e23sFv-R9-casp3蛋白,但SGC-7901细胞生长受到明显抑制,细胞形态发生改变,出现核浓缩等凋亡特征;而HeLa细胞生长未受抑制,细胞形态无明显变化。结论:以分泌形式表达的嵌合蛋白,其HER2抗体部分能够介导靶向识别,R9可以辅助效应分子活化、转位至细胞液,活性caspase-3能高效杀伤细胞。
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| 关 键 词： | 寡聚精氨酸 蛋白质转导结构域 嵌合基因 靶向治疗 |
Expression of a chimeric gene containing poly-arginine as the protein transduction domain and its killing activity against HER2 positive gastric cancer SGC-7901 cells |
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| ZHAO Zhi-ning,WANG Tao,REN Jun-lin,ZHANG Rui,ZHAO Jing,WEN Wei-hong,JIA Lin-tao,YANG An-gang.Expression of a chimeric gene containing poly-arginine as the protein transduction domain and its killing activity against HER2 positive gastric cancer SGC-7901 cells[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2010,26(8). |
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| Authors: | ZHAO Zhi-ning WANG Tao REN Jun-lin ZHANG Rui ZHAO Jing WEN Wei-hong JIA Lin-tao YANG An-gang |
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